维生素D缺乏对小鼠心肌氧化应激水平的影响及机制研究.PDF

·１０５０ · 医学研究生学报 ２０１６年１０月 第２９卷 第 １０期　 Ｊ Ｍｅｄ Ｐｏｓｔｇｒａ，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．１０，Ｏｃｔｏｂｅｒ，２０１６ 论　 　 著 （基础研究） 维生素Ｄ缺乏对小鼠心肌氧化应激水平的影响 及机制研究 汤　 沂，刘　 晶，谢　 亮，王立军，张启高，彭永平，宫剑滨，江时森 　 　 ［摘要］　 目的　 既往研究结果显示维生素Ｄ缺乏与心室重构的发生密切相关，但具体机制尚未明确。 氧化应激增加在 心室重构发生与进展过程中发挥重要的作用，文中拟探讨维生素Ｄ缺乏对小鼠心肌氧化应激水平的影响及可能相关的信号 通路。 　 方法　 实验采用３周龄的Ｃ５７小鼠，随机数字表法分成３组：维生素Ｄ缺乏组（维生素Ｄ缺乏饲料喂养１０周），维生 素Ｄ充足组（维生素Ｄ充足饲料喂养 １０周）及维生素Ｄ缺乏后补充组（维生素Ｄ缺乏饲料喂养 １０周后，转为维生素Ｄ充足 ＋ 饲料喂养 骨化三醇治疗 １０周）。 建模成功后，检测小鼠血液中２５羟维生素Ｄ３水平及相关生化指标，心脏超声检查小鼠心 脏腔室内径，８⁃ＯＨＤＧ染色测定小鼠心肌阳性细胞数，分别提取心肌线粒体蛋白、细胞核蛋白及总蛋白，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检查 ＴＸＮＩＰ、ＡＳＫ⁃１、Ｐ⁃ＡＳＫ⁃１、细胞色素Ｃ等蛋白表达量。 　 结果　 心脏超声结果显示维生素Ｄ充足组小鼠与维生素Ｄ缺乏组小 鼠相比较，心肌的左室舒张末期直径及左室质量指数均显著增高［（３．８２０±０．１２５）ｍｍ ｖｓ （３．７４８±０．０９２）ｍｍ，（１１９．３０±８．５４） ｖｓ （９７．６０±３．６５），Ｐ＜０．０５）。 在对小鼠心肌切片进行８⁃ＯＨＤＧ染色后发现，维生素Ｄ充足组小鼠心肌中８⁃ＯＨＤＧ染色阳性的心肌 细胞数（６５．４±２．３）显著高于维生素Ｄ缺乏组（２１．８±１．６），而补充骨化三醇后，可使８⁃ＯＨＤＧ染色阳性的心肌细胞数明显回落 （３６．４±１．５）。 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检查结果提示，维生素Ｄ充足组小鼠心肌中ＴＸＮＩＰ 蛋白的表达显著上调，并伴随有Ｐ⁃ＡＳＫ１／ ＡＳＫ⁃１ 的比值增加，Ｃｙｔ Ｃ的释放及Ｃｌｅａｖｅｄ ｃａｓｐａｓｅ３的增加。 　 结论　 维生素Ｄ缺乏可以引起心肌的氧化应激损伤，而损伤发生的 机制可能与ＴＸＮＩＰ蛋白表达的上调及ＡＳＫ⁃１相关的细胞凋亡通路的激活有关。 　 　 ［关键词］　 维生素Ｄ；氧化应激；心室重构；凋亡 　 　 ［中图分类号］　 Ｒ５９１．４　 　 　 ［文献标志码］　 Ａ　 　 　 ［文章编号］　 １００８⁃８１９９（２０１６）１０⁃１０５０⁃０５ 　 　 ［ＤＯＩ］　 １０．１６５７１／ ｊ．ｃｎｋｉ．１００８⁃８１９９．２０１６．１０．００９ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｎ ｔｈｅ ｃａｒｄｉａｃ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｉｎ ｍｉｃｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ＴＡＮＧＹｉ，ＬＩＵＪｉｎｇ，ＸＩＥＬｉａｎｇ，ＷＡＮＧＬｉ⁃ｊｕｎ，ＺＨＡＮＧＱｉ⁃ｇａｏ，ＰＥＮＧＹｏｎｇ⁃ｐｉｎｇ，ＧＯＮＧＪｉａｎ⁃ｂｉｎ，ＪＩＡＮＧＳｈｉ⁃ ｓｅｎ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｒｅｇｉｏｎ，ＰＬＡ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１０００２，Ｊｉａｎｇｓｕ， Ｃｈｉｎａ） 　 　 ［Ａｂｓｔｒａｃｔ ］　 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｐｒｅｖｉｏｕｓ ｓｔｕｄｉｅｓ ｈａｖｅ ｓｈｏｗｎｔｈａｔｖｉｔａｍｉｎ Ｄｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｓｃｌｏｓｅｌｙ ｒｅｌａｔｅｄｔｏｃａｒｄｉａｃｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ． Ｈｏｗ⁃ ｅｖｅｒ，ｔｈｅｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｈａｖｅｎｏｔｂｅｅｎｆｕｌｌｙｅｌｕｃｉｄａｔｅｄ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｏｎｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｅｓｏｆ ｃａｒｄｉａｃｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ．Ｔｈｅａｉｍｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆ ＶＤｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｏｎｃａｒｄｉａｃｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓａｎｄｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｓｉｇ⁃ ｎａｌ ｐａｔｈｗａｙ．　 Ｍｅｔｈｏｄｓ　 Ｔｈｅ ｍａｌｅ Ｃ５７ ｍｉｃｅ （３ ｗｅｅｋｓ ｏｌｄ） ｗｅｒｅ 基金项目：南京军区总医院科研基金（２０１３０４８）