实验十三血钙测定(偶氮胂Ⅲ络合比色法).pptVIP

佝偻病 一、目的 了解氯化物测定的原理、操作方法及临床意义。 二、原理 钙与偶氮胂Ⅲ反应生成复合物，在在600nm或者650-660nm下（红外线区域）有强烈的蓝色。 吸光度与钙浓度成比例 而同样为二价的镁离子并不生成复合物。 此波长下，能避免血清中的镁离子的干扰，并且血脂或血红蛋白等有色物质也不会对测试造成干扰。 三、试剂 试剂I:100ml×2 钙标准液(2.5mmol/l,10mg/dl): 2ml 四、操作 五、计算 CA=(A测定/A标准)×C标准 单位（mmol∕L） 【正常参考范围】 正常CA 2-2.5mmol/L 【临床意义】 血清钙升高常见于：甲状旁腺机能亢进，维生素使用过多，多发性骨髓瘤，肿瘤广泛的骨转移，急性骨萎缩等。 血清钙降低常见于：甲状旁腺机能减退，佝偻病，骨软化症，慢性肾炎、尿毒症等。　 六、注意事项 所有玻璃器皿要严格消毒,避免微量Ca的污染 七、思考题 什么是钙磷乘积?简述其生理意义。 血钙升高和降低的临床意义是什么？ 血液中的磷( phosphorus )主要有两种形式：有机磷和无机磷。 血清无机磷含量与血钙有一定关系，两者浓度的乘积为一常数（以mg/dl浓度计算，乘积等于40）。 磷参与机体糖、脂类及氨基酸的代谢，是骨盐的主要成分，也是转运能量的物质，磷酸盐是调节酸碱平衡的重要缓冲体系之一。 抗维生素D佝偻病 抗维生素D性佝偻病（vitaminD-resi-stantRickets）是一种肾小管遗传缺陷性疾病，发病率约1：25，000。 有低血磷性和低血钙性两种。比较多见的是低血磷性抗维生素D佝偻病，又称家族性低磷血症(familialhypophosphatemia)，或肾性低血磷性佝偻病(renalhypophosphatemicrickets)。 该病主要是由于位于X染色体上的PHEX基因的突变，导致肾小管回吸收磷减少所致，肠道吸收钙、磷不良。 血磷降低，一般在0.65－0.97/mmol/L(2－3mg/dl)之间，钙磷乘积多在30以下，骨质不易钙化。 【目的要求】 1.掌握还原钼蓝法测血磷的原理 2.熟悉血磷测定的其他方法 【实验原理】 利用磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成磷钼酸复合物，用对甲氨基酚硫酸盐还原生成钼蓝，与同样处理的标准液进行比色，可求得血磷的含量。试剂中加入聚山梨酯-80以抑制蛋白质干扰。 【操作步骤】 测定管（U） 标准管（S） 空白管（B） 去离子水（ml） -- -- 0.1 磷标准液（ml） -- 0.1 -- 血清 0.1 -- -- 显色液（ml） 4.0 4.0 4.0 【计算】 样品磷含量（mmol/L）= ×1.29 【临床意义】 1. 低磷血症见于 ①摄入不足和吸收减少：饥饿或恶病质、吸收不良综合征、呕吐、腹泻、长期应用含铝的制剂等；②磷转移入细胞内：静脉注射葡萄糖、胰岛素及碱中毒、妊娠等；③丢失过多：血液透析、肾小管酸中毒、急性痛风等；④其他：如酒精中毒、糖尿病酮症酸中毒、维生素D缺乏症等。 2. 高磷血症见于 甲状旁腺功能减退症、维生素D过多症、Addison病、肢端肥大症、多发性骨髓瘤等。 【参考值】 成人0.97 ～ 1.62 mmol/L 儿童1.45 ～ 2.10 mmol/L 体重约见5%的无机盐主要有Ca、Mg、K、Na、P和Cl，这六种无机元素约占体内无机盐总量的60%~80%，主要存在于体液。无机离子的测定方法主要有火焰光度法、化学测定法、离子选择电极法、代谢物酶试剂法等。 其中离子选择电极法标本用量少（100μl全血）,1min出结果，快而准确，操作简便，是目前广为临床使用的方法。 * * 混匀，37恒温10分钟，650nm波长，以空白管调零， 测定各管吸光度。 * * *