CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒.PDFVIP

CCCCKK--88细细胞胞增增殖殖及及细细胞胞毒毒性性检检测测试试剂剂盒盒 50T W LA074a 100T W LA074 b 仅用于科学研 究,不能用于诊断 产 品信息 产 品名称 CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 产 品概述 CCK-8细胞增殖及细胞 毒性检测试剂盒（CellCounting Kit-8（CCK-8））是一种基于 四唑盐 WST-8的广 泛 应 用 于 细 胞 增 殖 和 细 胞 毒性 的快 速 高 灵 敏 度 检 测 试 剂 盒 。WST-8是 一 种 类 似 于 MTT的化合物，在 电子耦合剂1-Methoxy PMS存在 的情况下，可 以被还原生成橙黄色水溶性 的 甲臜（ Formazan） 。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅 。对于 同样 的细胞，颜色 的深浅和细胞数 目呈线性关系 。 本试剂 盒提供 的CCK-8溶液不 需 配制， 可 以直接加 入到细胞 样 品 中， 对细胞 无 毒性 并且相 当稳 定， 因此可以长时间孵育 。另外 , 本方法产生 的Formazan是水溶性 的 , 不仅省去了溶解步骤 , 更 减少了误差 。 包装信息 W LA074a W LA074 b 试剂名称 （50T） （100T） 保存条件 有效期 CCK-8溶液 500μl 1ml 4℃ , 避光 一年 注意事项 1. 用酶标仪检测前需确保每个孔 内没有气泡，否则会干扰测定 。 2. 培养时间根据细胞种类的不 同和每孔 内细胞数量的多少而不 同。在正式实验前，建议先做预实 验摸索铺板 的细胞数量以及加入CCK-8试剂后 的培养时间。 操作流程 1. 在96孔板 中接种细胞悬浮液（100μl/孔），通 常细胞增殖实验每孔约2000个细胞，细胞毒性 实验每孔约5000个细胞，具体每孔所用的细胞 的数 目，需根据细胞 的大小 、细胞增殖速度 的快 慢等 因素决定 。 2. 根据实验需要确定特定 的药物刺激浓度 以及时间。 3. 药物处理细胞后，每孔加入10μlCC K-8溶液 。如果起始 的培养条件体积为200μl，则需加入 20μlCC K-8溶液， 以此类推 。可以用加相应量细胞培养基和CC K-8但不加细胞 的孔作为空 白对 照，若担心所使用的药物会干扰检测，需设置加相应量细胞培养液 、药物和CC K-8溶液但不加细 胞 的孔作为空 白对照。 4 . 在细胞培养箱 内继续孵育1 -4 h , 具体 时间可以通过预实验确定 。预实验 时可以在0 .5、1、2和 4 h后分别用酶标仪检测，然后选取 吸光度范 围比较适宜的一个 时间点用于后续试验 。 5. 用酶标仪测定在4 50 nm处的吸光值 。若无4 50 nm滤光片，可以使用420-4 80 nm的滤光片。 6. 活力计算： *细胞活力（%）= [A（加药）-A（空 白）]/ [A（0加药）-A（空 白）] ×1 00 A（加药）：具有细胞 、CC K-8溶液和药物溶液 的孔 的吸光度 。 A（空 白）：具有培养基和CC K-8溶液而没有细胞 的孔 的吸光度 。 A（0加药）：具有细胞 、CC K-8溶液而没有药物溶液 的孔 的吸光度 。 *细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力 。 Wa nleibio Co., Ltd. 400-602-0407 sales@ www.wa