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体内蛋白质代谢的测量的主要方法 　　摘要：本文主要描述了进二三十年里测量体内蛋白平衡的主要方法，包括全身和特定器官的氮平衡，全身或特定器官的蛋白质转化，测量全身蛋白质流量的同位素示踪物，特定组织、器官蛋白质转换量的测量。 　　Abstract: This paper describes the main methods to measure protein metabolisminside the body in two or three decades, including systemic and organ-specific nitrogen balance, whole body or specific organs of the protein transformation, the body measurement of protein flow isotope tracers, specific tissues and the measurement of organs protein transformation. 　　关键词：蛋白质代谢； 蛋白质转化量； 同位素示踪法 　　Key words: protein metabolism; protein transformation capacity; isotope tracer method 　　中图分类号：Q26 文献标识码：A文章编号：1006-4311（2010）36-0179-01 　　 　　0引言 　　对于细胞或组织，蛋白质平衡反映了净的蛋白质合成和分解。在不同的组织、器官以及细胞内细胞质、细胞核和线粒体中蛋白质的合成和分解有很大不同，人体蛋白质平衡是以上过程的总和。在过去的二三十年里进行了许多定量研究全身或特点组织人类在体蛋白质代谢。这些实验几乎都采用了标记物测量。每种方法都有缺点和局限性，在此复杂的动态过程中需要模型假设来界定所有可用方法的准确性。 　　1全身和特定器官的氮平衡 　　早期研究全身氮平衡的方法是，简单的使用化学分析法分析氮的摄入和排泄。随着自动氨基酸分析法发展，可测量氨基酸穿过组织床（肌肉、肝、脑等）的净差值。静态下这种估算方法能测量蛋白质的增加和流失，但不能深入地测量全身或局部组织蛋白合成和分解的过程。然而，由于这种测量方法不需要伴随标记物法的模型假设，作为一种评价全身或局部对营养、激素和其他处理独立方法，还是有用的。 　　2全身或特定器官的蛋白质转化量 　　几种新方法的应用，拓展研究全身或组织氨基酸平衡的限制。每种必需氨基酸标记的新方法都基于一种假设，即必需氨基酸的动力学能够蛋白质池的动力学。因为体内不能合成必需氨基酸，血液内输入稳定的稀释的示踪物特异性氨基酸能反映流入血液的源于蛋白质分解和食物摄取的未标记的氨基酸（显示率Ra）。相反，血液内示踪物消失率（Rd）表现了血清内氨基酸氧化为CO2和非氧化的清理。因此如能合理的选择示踪物基本上能估算出人体蛋白合成。 　　2.1 测量全身蛋白质流量的同位素示踪物 　　当前对全身蛋白质流量估算最常用的标记物是L-[1-*C]亮氨酸或L-[*H5]苯丙氨酸，采用反射性或稳定的同位素示踪物，预先制备，连续静脉灌注。随着持续的静脉内灌注，大约2小时后动脉血浆中的浓化/比活性到达高原值（恒稳状态）。在恒稳状态，全身蛋白质流量等于血浆游离氨基酸池的被示踪物显示率和游离氨基酸被示踪物消失率，每个值都可通过示踪物输入率除以动脉血浆比活性/富集来估算。采用标记的亮氨酸作为示踪物，静脉内的，酮异己酸 （-KIC）亮氨酸转氨基作用后的产物，能更好的反映在细胞内游离氨基酸池的亮氨酸浓度。 　　另外，标记C1的亮氨酸，能测量形成CO2的失去标记，蛋白质的合成和分解均能进行。这种方法是现在同时估算蛋白质分解和合成的最准确的方法。由于灌注的示踪物的迅速平衡，借助这种方法，能估算特殊的干预所致平衡状态的动态改变。 　　此法的局限性是在一定程度上低估了组织蛋白质的总的转换。后者可由测量骨骼肌-KIC的比活性（或富集）的情况下部分补偿。低转氨酶活性的组织是否满足此补偿尚不清楚。此外，对于合成的估算还被机体碳酸氢根池所影响。撇开以上问题，稳定状态下[1-*C]亮氨酸灌注法是当前测量全身蛋白质转换量的可被接受的标准。 　　2.2 特定组织、器官蛋白质转换量的测量 　　对于特定组织器官蛋白质的分解和合成的采用器官平衡和示踪物相结合的方法。此方法需要对所研究组织血流的动静脉样本。在这种方法里，预先制备好亮氨酸和苯丙氨酸示踪物，持续静脉内输入直到达到血浆内稳定的平衡。在示踪物稳定输入的过程中，测量组织摄取示踪物（Rd）和其穿过该组织比活度的稀释（Ra）可以用来分别估算蛋白质的合成和分解。此计算是根