北极海洋细菌BSw20353的胞外蛋白酶性质.PDFVIP

第 18卷第 3期 极地研究 Vol. 18, No. 3 2006年 9 月 CH IN ESE JOURNAL OF POLAR RESEARCH Sep tember 2006 研究论文 北极海洋细菌 BSw20353 的胞外蛋白酶性质 曾胤新 　俞勇 　李会荣 　陈波 (中国极地研究中心 , 国家海洋局极地科学重点实验室 ,上海 200 136) 提要 　从北极楚科奇海水中分离到一株产蛋白酶耐冷河豚毒素假交替单胞菌 B Sw20353。该菌 可合成多种胞外蛋白酶 ,而培养温度影响蛋白酶的合成 。分离纯化出其中一种在 15 ℃、25 ℃培 2 + 2 + 2 + 养时均有生成的酶 :该酶最适作用温度 55 ℃;最适 pH 8;金属离子 H g 、Sr 抑制酶活 , Fe 、 M n2 + 则具有激活作用 ;该酶属于金属蛋白酶 ,受螯合剂邻二氮杂菲 、ED TA 及 EGTA 抑制 ,基本 不受丝氨酸蛋白酶抑制剂 PM SF、TPCK及 TLCK抑制 ,半胱氨酸蛋白酶抑制剂 E64 对该酶无抑 制作用 ,天冬氨酸蛋白酶抑制剂 p ep statin则具有一定抑制作用 ; SD S、二硫苏糖醇 、碘乙酸可抑制 酶活 ;而在变性剂尿素 、盐酸胍作用下 ,酶活反而有所增高 。 关键词 　河豚毒素假交替单胞菌 　北极 　金属蛋白酶 1　引言 蛋白酶是一种重要的工业酶制剂 ,主要应用于食品工业 、洗涤产品以及皮革处理等领 域 。由于具有低温条件下催化效率高 、温和热处理易失活等特点 ,低温蛋白酶在一些需要 低温工作条件的工业处理中具有潜在应用价值 。产低温蛋白酶的微生物主要来源于一些 ( ) 极端环境 ,如深海 、冰川 、高山及极地等 ,主要有交替单胞菌属 A lterom onas 、芽孢杆菌属 ( ) ( ) ( ) ( B acillus 、微小杆菌属 Ex ig uobacterium 、黄杆菌属 F lavobacterium 、海杆菌属 M a ri ) ( ) ( ) nobacter 、土地杆菌属 P edobacter 、假交替单胞菌属 Pseudoa lterm onas 、假单胞菌属 ( ) ( ) ( ) ( Pseudom onas 、嗜冷杆菌属 Psy ch robacter 、沙雷 氏菌属 S erra tia 、希瓦 氏菌属 S he ) ( ) ( ) w anella 、寡养单胞菌属 S tenotrop hom onas 以及耶尔森氏菌属 Yers in ia 等 。在极地海洋 ( 中 ,产蛋白酶细菌分布广泛 ,并且在分离菌株中具有较高比例 Hu ston and D em ing, 2002; Zeng et a l. , 2004 ) 。