实验室玻璃器皿、培养基的灭菌技术要点.pptVIP

玻璃器皿、培养基的灭菌技术 概念 消毒：杀死物体上病原微生物的方法,并不一定 能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。 灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。 无菌：不存在活菌的意思。 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。 一、消毒与灭菌的方法 物理的方法：加热、过滤、辐射 化学的方法：用化学试剂抑制或杀灭微生物。主要破坏细菌代谢机能。如重金属离子，磺胺类药物及抗生素等。 物理方法 干热灭菌又称热空气灭菌，是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性的原理。 湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高。 物理方法 辐射：利用辐射进行灭菌消毒，可以避免高温灭菌或化学药剂消毒的缺点，所以应用越来越广。 物理方法 1）紫外线：波长200~300m的紫外线具有杀菌作用。 杀菌机理：干扰DNA的复制与转录。 特点：穿透力不大。距照射物1.2m为宜。 应用范围：空气消毒。例如，手术室、传染病房、细菌实验室不耐热物品的表面消毒。 注意事项：对眼睛和皮肤有刺激作用。 物理方法 2）电离辐射：包括高速电子、X射线和 γ 射线杀菌机理：产生游离基,破坏DNA。 应用范围：一次性医用塑料制品的消毒食品的消毒不破坏其营养成分 物理方法 过滤：采用机械方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器。通过过滤，只让液体培养基从筛子中流下，而把各种微生物菌体留在筛子上面，从而达到除菌的目的。 这种灭菌方法适用于一些对热不稳定的体积小的液体培养基的灭菌以及气体的灭菌。 它的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。但是比细菌还小的病毒仍然能留在液体培养基内，有时会给实验带来一定的麻烦。 过滤注意事项：1、压力适当； 2、无菌条件下进行； 3、防止渗透现象。 化学方法 一般化学药剂无法杀死所有的微生物，而只能杀死其中的病原微生物，所以是起消毒剂的作用，而不是灭菌剂。 各种消毒剂的种类 各种消毒剂的应用 干热灭菌 适用范围： 用于高温下不损坏、不变质、不蒸发物品的灭菌；用于不耐湿热的器械的灭菌；用于蒸汽或气体不能穿透物品的灭菌，如玻璃、油脂、粉剂（遇水结块）和金属等制品的消毒。 干热灭菌 干热灭菌法又分为烧灼和焚烧、干烤、红外线、微波等几种方法。 干热灭菌 （1）烧灼和焚烧：烧灼是直接用火焰杀死微生物，适用于实验室的金属器械（镊、剪、接种环、接种针等）、玻璃试管口和瓶口等不怕热的器材灭菌。 焚烧是彻底的消毒方法，但只限于处理废弃的污染物品，如无用的衣物、纸张、垃圾等。焚烧应在专用的焚烧炉内进行。 干热灭菌 （2）干烤：在干烤箱内进行，加热至160℃～170℃维持2小时，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。 此方法适用于耐高温的玻璃器皿、瓷器、玻质注射器等。 干热灭菌 （3）红外线：是波长为770nm～1000μm的电磁波，以1μm～10μm波长的热效应最强。亦被认为一种干热灭菌。红外线由红外线灯泡产生,不需要经空气传导，所以加热速度快，但热效应只能在照射到的表面产生，因此不能使一个物体的前后左右均匀加热。红外线的杀菌作用与干热相似，利用红外线烤箱灭菌的所需温度和时间亦同于干烤。多用于医疗器械的灭菌。 干热灭菌 红外线灭菌注意事项： 人受红外线照射较长会感觉眼睛疲劳及头疼；长期照射会造成眼内损伤。因此，工作人至少应戴能防红外线伤害的防护镜。 干热灭菌 （4）微波：波长为1mm～1000mm的电磁波统称为微波，可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属表面。微波能使介质内杂乱无章的极性分子在微波场的作用下，按波的频率往返运动，互相冲撞和磨擦而产生热，介质的温度可随之升高，因而在较低的温度下能起到消毒作用。 干热灭菌 一般认为其杀菌机理除热效应以外，还有电磁共振效应，磁场致力效应等的作用。消毒中常用的微波有2450MHZ与915MHZ两种。微波照射多用于食品加工。在医院中可用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品食具、药杯及其它用品的消毒。 干热灭菌 微波长期照射可引起眼睛的晶状混浊、睾丸损伤和神经功能紊乱等全身性反应，因此必须关好门后再开始操作。 干热灭菌 干热灭菌的注意事项： 待灭菌的物品在干热灭菌前应先洗净，防止造成灭菌失败或污物炭化； 玻璃器皿灭菌前应洗净并干燥； 灭菌时勿与烤箱底部及四壁接触，灭菌后要待温度降到40℃以下再开箱，以防止爆裂； 物品包装不能过大，不超过10厘米×10厘米×20厘米，物品不能超过烤箱的高度的2/3，物品间应留有充