抗体和抗体的选择.docVIP

抗体及抗体的选择 抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。 　　抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体（Monclone antibody）。由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，机体内所产生的抗体就是多克隆抗体；除了抗原决定簇的多样性以外，同样一类抗原决定簇，也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。 　　抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构，叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇，因而使机体产生好几种不同的抗体，最终产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系，纯系的英文为Clone，音译就是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就象导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。 　　多克隆抗体又简称多抗。与之相对应的叫单克隆抗体，简称单抗。 动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，重排后具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具 有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞（浆细胞）和记忆B细胞，大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中。如果 能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体。首先我们认识下单克隆抗体与多克隆抗体的区别：　1、抗原决定簇：决定抗原性的特殊化学基团，可刺激B淋巴细胞产生对应的抗体。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇，而且抗原分子越大，决定簇的数目可能越多。 　　2、多克隆抗体：同一抗原上的多个抗原决定簇同时刺激机体产生的针对不同抗原决定簇的抗体混合物（即在免疫反应中，混合物中的抗体均能与同一抗原起反应，只是针对的抗原决定簇不一样） 　　3、单克隆抗体：单纯针对某一抗原上的某一抗原决定簇的抗体，通常由合成该专一性抗体的单克隆B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后的杂交细胞(杂种瘤)大量产生，分离纯化而得。 然后我们一起分析下两种类型抗体的优点： 　　1、单克隆抗体：只针对某一抗原决定簇，相对特异性更高（不同抗原可能有相同的抗原决定簇）　　2、多克隆抗体：与抗体的亲和力和灵敏度相对较高（目标广泛） 如果你的一抗使用的是单克隆抗体，因为单克隆抗体是用小鼠的脾脏细胞和骨髓瘤细胞融合产生的，因此分泌的抗体为单体针对单一表位，在选择二抗时，必须用抗鼠的抗体。如果你是用的抗体是多克隆抗体，一般这个抗体是用原核表达的目的蛋白，免疫兔子后抽血分离血清纯化后获得的抗体，因此在二抗上必须选择抗兔子的抗体。举个例子：从小鼠身上提取出的某种抗原注入到兔子身上，兔子进行免疫出来的这种抗原为兔抗鼠的，如果作为你的一抗，你的2抗就必须是抗兔的，比如羊抗兔。一般用多抗，有很多的结合位点比较好做。