一株产普鲁兰酶芽孢杆菌的筛选鉴定及发酵条件优化.pdfVIP

第44卷第 lO期 应 用 化 工 Vo1．4_4No．10 2015年 1O月 AppliedChemicalIndustry 0et．2015 一 株产普鲁兰酶芽孢杆菌的筛选鉴定及 发酵条件优化 宋勇强，胡先望，张鸣明，严晓娟，沙芮，梁宁 (甘肃省商业科技研究所，甘肃 兰州 730010) 摘 要：从甘肃定西某淀粉加工厂附近土壤中分离得到一株产普鲁兰酶酶源菌AI一1，通过形态学、生理生化试验及 16SrRNA序列鉴定并对其进行系统发育分析，鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)，对其发酵培养基 成分和发酵条件进行了优化。优化后的发酵培养基成分为：可溶性淀粉 1．5％，酵母膏 1％，蛋 白胨 1％，NaC1 0．5％，K2HPO40．1％，MgSO4·7H2O0．05％；最佳发酵条件为：培养温度 36℃，发酵培养基初始 pH7．0，接种量 8％( )，摇床转速 150r／min，发酵周期72h。在此优化条件下，菌株 AI．1发酵所产普鲁兰酶的酶活由最初的 2．45U／mL提高到了4．52U／mL。 关键词：普鲁兰酶；筛选鉴定 ；发酵条件 ；优化 中图分类号：TQ925．1 文献标识码：A 文章编号：1671—3206(2015)10—1803—08 Screening，identificationofabacillusstrainproducingPullulanase andoptimization ofitsfermentation conditions SONG 一qiang，HUXian—wang，ZHANG 一ming， ⅣXiaojuan，SHARui，LIANGM (GansuInstituteofBusinessTechnology，Lanzhou730010，China) Abstract：A strainAI一1havingPullulanaseactivitywasisolatedfrom thesoilnearastarch—processinghe· toryinDingxi，Gansuprovince．Theoptimalcultureconditionsforenzymeproductionweredetermined． Basedon16SrRNA sequencehomologyanalysisandphylogeneticanalysis．AI一1wasidentifiedasBacillus amyloliquefaciens，wihtitsphysiologicalandbiochemistrycharacters．Andthenitsfermentationmedium compositionandfermentationconditionswereoptimized，theoptimum fermentationmedium composition wereasfollows：solublestarch 1．5％ ，yeastextract1％ ，peptone1％ ，NaC10．5％ ，K2HPO40．1％ ，Mg— SO4 ·7H200．05％ ．Undertheoptimum fermentationconditionofinitial36℃ ，pH 7．0，150r／minand aninoculumsizeof8％( )f0r72h，theactivityofPullulanaseproducedbyAI一1reachedthepeakat 4．52U／mLfrom hteinitialactivityof2．45U／mL． Keywords：Pullulanase；screeningandidentifica