益生菌作为基因工程受体菌的研究.pdf

科技颜野 饲料广角》2002年第21期 1．前言 菌种类主要有双歧杆菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、酵 20世纪90年代母菌等。 后期，国内外学者开 2．1乳酸杆菌 始应用基因工程技术 乳酸杆菌作为主要的益生菌已广泛应用于 有目的、有选择地研 食品及饲料加工业，构建具有广泛宿主范围的质 制新一代微生态制 粒载体系统已十分成功地转化到乳酸菌并表达 剂。换句话说，就是正 内源及外源蛋白，在功能食品、医疗保健、微生态 常菌群作为外源基因 制剂等领域的应用具有诱人的前景。如荷兰学者 毕英佐 表达受体，尤为双歧 将人脑蛋白多肽基因转入乳杆菌后，给小鼠、大 杆菌、乳酸杆菌、芽孢 鼠口服，发现可抑制实验性过敏性脑脊髓炎。另 马现永 杆菌、酵母菌作为工 外，Okafor等将编码8一赖氨酸的合成赖氨酸基 程菌的受体，通过分 子克隆、基因重组技 术，将外源基因(某种 及几种乳杆菌。经转化后，赖氨酸分泌量可提高 营养因子基因、抗性 2．5～6倍。乳酸杆菌另一个在医学领域具有很大 基因、酶基因等)转入 应用潜力的方向是将其作为某些免疫接种的疫 构建的新菌株，使其 苗载体。乳酸杆菌作为疫苗载体具有较大的优越 表达外源蛋白，直接 性：(1)在呼吸系统、消化系统、泌尿系统定植，对 添加到饲料中或者让 维持微生态平衡很重要；(2)在发酵食物中应用 构建的新菌株再回到 了几个世纪，被认为是GRAS(GenerallyRecog． nizedAs 肠道内，在肠道内生 Safe)微生物；(3)同肠胃外免疫途径相 长繁殖，除发挥原有 比，通过黏膜免疫，可以诱发IgA产生；(4)免疫方 的益生功能，还能发 便、便宜、安全，不需要注射；(5)具有免疫佐剂作 挥特殊基因的功能， 用；(6)同其它活载体(如减毒大肠杆菌、沙门氏 曹永长一华南农业大学动物科学学院基因工程实验室一 达到一种制剂多种功 菌、病毒)相比，乳酸杆菌作载体无免疫原性，所 能的目的。其基本原 以无病原性、食物级或共生、共栖性的乳酸杆菌 理或操作过程如下： 作为疫苗载体受到广泛关注。研究表明，干酪乳 首先用一定的方法将 杆菌与植物乳杆菌具有很强的免疫刺激能力，目 麓麓毯熊麓穗曝曩毽暨一熊篾麓曛爨 所需要的目的DNA前已用于表达炭疽杆菌抗原以及破伤风毒素片 片段从某一生物供体 断c抗原等，鼻腔内应用产生了系统的IgG与局 中克隆出来，其次，在离体的条件下用适当的工 具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子 连接起来，形成重组DNA分子，然后将重组DNA胞内已成功地表达了霍乱毒素B亚单位。Pascal 分子转移到受体微生物中，最后经筛选可得到重 组