淇河鲫肌肉生长抑制素基因的克隆与表达_田雪.pdfVIP

第41 卷 第 1 期 水 产 学 报 Vol. 41, No. 1 2017 年 1 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Jan., 2017 文章编号: 1000-0615(2017)01-0011-10 DOI: 10.11964/jfc.20160610434 淇河鲫肌肉生长抑制素基因的克隆与表达 1 1 2 1 田 雪 ， 王良炎 ， 刘洋洋 ， 胡灿灿 ， 1 1 1* 庞小磊 ， 吴利敏 ， 李学军 (1. 河南师范大学水产学院，河南省水产动物养殖工程技术研究中心，河南 新乡 453007; 2. 周口科技职业学院医学系，河南 周口 466000) 摘要：肌肉生长抑制素(MSTN)是动物肌肉发育和生长过程中的负调控因子。为了明确 淇河鲫MSTN 基因序列及其在肌肉生长发育中的调控功能，本研究利用RACE方法克隆淇 河鲫MSTN 全长cDNA序列，qRT-PCR分析其在不同组织和胚胎发育阶段的表达情况。结 果显示，淇河鲫MSTN cDNA序列全长2094 bp (no. KC851952.1) ，包含86 bp 5′ 非编码区、 880 bp 3′ 非编码区和1128 bp开放阅读框，编码375个氨基酸残基，前22个氨基酸残基为 信号肽，34~256位氨基酸残基为TGF-β前肽域，281~375是TGF-β结构域，具蛋白酶水解 位点RIRR和C端生物活性区的9个保守半胱氨酸残基。蛋白同源分析发现淇河鲫MSTN 与 鲤形目鱼类相似性较高，与哺乳动物和鸟类的相似性最低。系统进化分析显示，淇河鲫 MSTN 与鲫、鲤、鳡等鲤科鱼类亲缘关系较近。实时定量PCR分析表明，淇河鲫MSTN 基 因在各个组织中均有表达，脑中表达量最高，其次为肌肉和肝脏，肠道表达量最低。淇 河鲫胚胎发育的各阶段MSTN 基因均有表达，受精卵表达量最高，其次为囊胚期，神经 胚期表达量最低。推测MSTN 与淇河鲫肌肉发育生长具有一定的相关性，可能参与“双背 鲫”特征的形成。 关键词: 淇河鲫；肌肉生长抑制素；克隆；组织表达 中图分类号: Q 785 ；S 917.4 文献标志码: A 肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)首先从小 调控作用，近年来受到研究者广泛关注。 [1] [6] [7] 鼠(Mus musculus)骨骼肌cDNA文库中克隆获得 ， 迄今，除哺乳类 和鸟类 外，鱼类MSTN基 具有转化生长因子-β(transforming growth factor β, 因也被大量克隆，包括鲤形目(Cypriniformes) 的 TGF-β)家族共有的结构特点：N端前肽区；C端