【2017年整理】第十三章 革兰氏阳性产芽孢杆菌.ppt

第十三章;第一节 芽孢杆菌属(Bacillus) ;炭疽芽孢杆菌(B.anthracis) ;一、主要生物学特性 （一）形态及染色 G＋大杆菌（5～10μm），无鞭毛，不运动。 动物体内 常3～5个菌体连成短链，外有荚膜，不形成芽孢。 培养基中 形成长链，形成芽孢。普通培养基中不形成荚膜，但在含血液、血清的培养基，CO2环境中培养则形成荚膜。 ;炭疽杆菌典型形态;炭疽杆菌培养物涂片;炭疽杆菌的芽孢;炭疽杆菌形成芽孢的条件： ① 有充分的O2 ② 25～35℃ ③ 有一定的湿度 ④ 中性或弱碱性环境 由于炭疽杆菌在体外可形成芽孢，所以，我国兽医法规定：禁止解剖死于炭疽的动物尸体。 ;（二）生长要求及培养特性 1、生长要求 37℃ 、有氧、普通培养基 ;2、培养特性 普通琼脂 形成灰白色、不透明、大而扁平、 表面干燥、边缘呈卷发状的菌落。 血 琼 脂 不溶血，个别菌株可轻微溶血。 普通肉汤 24h后，上部液体透明，管底有白 色絮状沉淀，轻摇试管，沉淀物徐 徐上升，卷绕成团而不散开。 明胶穿刺 倒松树状生长，明胶上部逐渐液化 呈漏斗状。 青霉素培养基 0.5IU／ml，串珠反应;炭疽杆菌在普通琼脂培养基上形成的卷发样菌落;炭疽杆菌在血琼脂培养基上形成的菌落;（三）抵抗力 本菌繁殖体的抵抗力并不强，与一般细菌相似。75℃5～15min即可将其杀死。 但该菌的芽孢抵抗力特别强。煮15min通常不能将其杀死，需高压或干烤方能将其杀死。 干燥皮毛上的芽孢，可存活10年以上。土壤被其污染，传染性常可保持20～30年。;（四）抗原结构 1、荚膜抗原 为半抗原，成分为多肽，仅见于有毒菌株，与毒力有关。此抗原的抗体无保护作用，但其反应性较特异，可用于血清学鉴定，如荚膜肿胀试验及免疫荧光抗体法等检测的就是这种抗原。 2、菌体抗原 成分为多糖，与毒力无关，但性质稳定，经腐败和高温处理不被破坏，可与炭疽阳性血清发生沉淀反应，故可用于皮毛等畜产品的检验。;3、保护性抗原（PA） 是一种胞外蛋白质抗原，为炭疽毒素的组成成分之一，具有免疫原性，能使机体产生抗炭疽杆菌感染的保护力。 4、芽孢抗原 是??孢外膜层含有的抗原决定簇，它与皮质一起组成炭疽芽孢的特异性抗原，具有免疫原性和血清学诊断价值。;二、致病性 （一）毒力因子 1、荚膜 增强细菌的抗吞噬能力，有利于细菌扩散。 2、炭疽毒素(anthrax toxin) 包括水肿毒素及致死毒素两种。毒性作用主要是损伤微血管的内皮，增强微血管的通透性，改变血液循环动力学，损害肾脏功能，干扰糖代谢，血液呈高凝状态，易形成感染性休克和弥漫性血管内凝血，最后导致动物死亡。;炭疽毒素由三种亚单位构成。 水肿因子（edema factor,EF） 致死因子（lethal factor,LF） 保护性抗原（protective antigen,PA） 三者单独存在均无毒性，只有PA与EF或 者LF结合才有毒性作用。;（二）所致疾病 本菌可致各种家畜、野兽和人类的炭疽病。主要通过消化道传染，但也可经呼吸道及皮肤创伤或通过吸血昆虫传播。 草食动物 急性败血症 肉食动物 胃肠炎、咽炎 杂食动物 慢性咽喉肿胀或隐性感染 人 肠炭疽、肺炭疽或皮肤炭疽 实验动物 小白鼠、豚鼠、家兔均易感;死于炭疽的牛瘤胃鼓气，天然孔流血，肛门突出;病猪咽喉部肿大;死于炭疽的牛脾脏显著肿大;人的皮肤炭疽; 人的皮肤炭疽;三、微生物学诊断 死于炭疽的病畜尸体严禁剖检。 炭疽尸体特征变化： 天然孔出血、血凝不良、尸僵不全、腹部鼓胀、可视粘膜发绀、皮下结缔组织呈黄色胶样浸润。 确诊可作细菌学检查和血清学检查。 ;（一）细菌学检查 1、病料采集 生前：水肿液或血液 死后：耳朵 肠炭疽：粪便 若已错剖畜尸，可采取脾、肝等进行检验，尸体就地深埋2米以下，表面用20%的石灰乳消毒。;2、镜检 病料涂片干燥后，在10%的福尔马林溶液或在0.1%升汞中浸泡10～15分钟，然后用美蓝或瑞氏染色法染色镜检，如发现有荚膜的竹节状大杆菌，即可作出初步诊断。; 3、分离培养 可用普通琼脂或血琼脂平板，得到的纯培养物可作以下鉴定： ① 噬菌体裂解试验 ② 青霉素抑菌试验 ③ 荚膜形成试验 ④ 串珠试验 ⑤ 溶血试验;4、动物试验 将被检材料制成1：5悬液，皮下注射小鼠、豚鼠或家兔。动物通常于注射后24～72h死于败血症。 剖检可见注射部位胶样浸润及脾脏肿大等病理变化。取血液、脏器涂片镜检，当发现竹节状有荚膜的大杆菌时，即可诊断。;（二）血清学检查 多用已知抗体检查被检的抗原。 如： 炭疽环状沉淀反