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中学生生物学实验
草履虫的采集、培养和观察
观察草履虫是中学动物学的第一个实验。学生通过实验,不但能掌握本章的基础知识,而且还能启发他们的学习积极性和培养他们的能力。但要做好这个实验,必须解决实验材料问题。为此,根据盐城师范学院的具体情况,对草履虫采集、培养和观察进行了为期近三个星期的探索。
采集
本人于2014年5月9日分别在盐城师范学院喷泉广场的河边、阳光小区附近的污水沟、无人打理的池塘边采集得多种草履虫,如短小的草履虫、运动是跳跃式的粗毛的草履虫和尾草履虫。经过查阅相关文献,本人发现以浸有较多的烂草或浸着牛粪于塘边的池水中含草履虫最多。
采集草履虫用的容器,最好是透明度较好的白玻璃瓶。这样较容易观察到所采集的池水中是否有草履虫和数量有多少。如果看见瓶里的池水中有一些小白点在移动,这很可能是草履虫。但采集到的材料,还不能直接用于实验。因为池水中草履虫的数量还很少,用滴管滴一滴制成装片在显微镜下观察,不一定能找到草履虫,并且虫体太小,难以观察内部构造,所以必须经过培养。
分离与纯化
如果按照教科书所说,把稻草浸泡在含草履虫的池水中培养,那么草履虫不一定能保得好,并有可能培养出其他浮游生物。前人也做过多次这样的实验,用显微镜检查,可以看到许多浮游生物如轮虫、水蚤和钟虫等。所以池水须先提纯。怎样提纯呢?如果将池水用滴管滴在载玻片挑选,找到了草履虫而又无杂物时,才接种到稻草煮出液中,这种方法既繁杂且培养速度又慢。本人将用离心法纯化草履虫。
先将稻草浸泡在含有草履虫的池水中3天,再稀释。用吸管吸取草履虫最大密度时培养液的上层液置于10只离心管内在离心机高速(4000转/min)离心3min待离心机停止转动后,立即取出离心管,草履虫集中于玻璃管底壁上:用吸管轻轻吸去无草履虫的上层液,即可用于实验[1]。此方法适合于具有离心机的大专院校和城市中学,对没有离心机的学校,特别是农村中学则很难实现[2]。
3、草履虫的培养
培养方法有多种。可将草履虫池水接种到稻草煮液中进行培养。也可将剪碎的稻草,浸泡在提纯的含草履虫池水中。这两种方法进行多次对比实验后,本人认为后一种培养方法较好。因为前一种培养法,把绝大多数的细菌和单细胞藻类煮死了,而这些可供草履虫食用。在采用后一种培养法时,所提纯的池水和干稻草里,存在供草履虫食物的细菌和藻类较多。有了稻草浸出营养物质,细菌和单细胞藻类就能迅速繁殖。
培养的操作步骤:①把稻草剪成2—3厘米长的小段,装进广口瓶中(半瓶即可);②将经过提纯的池水倒入瓶中浸泡稻草,不可灌满、须留有空气;③用单层纱布包好瓶口,防止蚊子产卵到瓶内;④放置在温度为25℃左右的地方。一周左右,瓶内培养液的表面将结有一层菌膜。菌膜下面密集着许多游动的小白点,这就是草履虫。
观察
用吸管从菌膜下面草履虫密集的地方,吸取一滴培养液,放在载玻片上。先用肉眼观察,一般都可看到6—10个草履虫。它的大小有削尖的铅笔点在纸上的痕迹那么大。然后,盖上盖玻片,用50倍的显微镜观察。这时可见草履虫象一个倒转的草鞋,前端较园,后端较尖,中间部分的一侧有一个凹沟。草履虫在水中旋转前进,不停地运动着。
要观察草履虫的结构,必须设法使其停止运动。如果用药物杀死,那就无法观察草履虫的生理活动。按照课本用棉花纤维进行栏阻,只能把草履虫限制在一定的范围内活动。草履虫是一个胶囊状的动物体。它能先缩小前部分,再缩小后部分,从棉花纤维迭架的间隙慢慢地爬过去。这对观察结构是有影响的。经过多次实验,找到了两种较好的使草履虫停止活动的方法:凉干法和粘结法。
在使用凉干法时,先滴一滴草履虫培养液在载玻片上。等到凉得稍为干些,或用风扇吹,加速凉干,草履虫就不游动,此刻观察最好。如果太干了,虫体会破裂。凉干法也可以结合栏阻法,即凉干到一定程度时,用过滤嘴香烟的纤维,交叉地放几条、然后盖上盖玻片,可延长观察时间。
在使用粘结法时,先用一克淀粉加50毫升水煮成稀糊。用时,先取一滴稀糊滴在载玻片上,然后取一滴培养液在稀糊上,用牙签拌匀,盖上载玻片。草履虫因受稀糊的粘附,运动受阻,甚至不动,适合镜下观察。
4、结论
草履虫的身体较为透明。用50~100倍显微镜观察,除了看到纤毛、口沟、大核、食物泡、伸缩泡和周围的收集管等结构外,还看到以下3点有趣的生理变化。
其一是用50倍显微镜时,视野较阔,有时可以见到正在进行分裂生殖的草履虫。这时在它的中部、好象被一条线扎紧那样,拦腰凹下去,仅有部分相连,但还在作迅速游动。待一会儿,它突然停下来,再略过一会儿,就断裂成两个草履虫,接着马上分开运动。
其二是在用100倍显微镜观察结构时,可以见到食物泡的形成扣食物泡在体内的移动。这就是草履虫的取食和消化的情况。由于口沟里的纤毛不停地摆动,使水中的食物——细胞和单细胞藻类,由胞口和胞咽
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