冰冻切片的实的用技术及相关临床应用.ppt

冰冻切片的实用技术; 冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。冰冻切片的种类较多，有低温恒冷箱冰冻切片法，二氧化碳冰冻切片法，甲醇循环制冷冰冻切片法等。这些方法，随着时代的变迁，科技的发展，许多年前被认为是非常重要的技术，现在也逐步被淘汰了。当然有些技术，如低温恒冷箱冰冻切片法，正在受到青睐。 ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;冰冻切片的制备及注意事项;温度 冰冻切片机昼夜24h处于预冷的- 4℃左右, 做快速切片时将温度降到组织块所需温度。不同组织对温度要求不同, 温度过低, 组织变脆、易碎, 温度过高则组织过软, 不能切片[1]。;切片 使用前将刀架与组织块的角度调整好, 调整好后不需要经常变换角度, 保持刀口锋利。切片机内要保持清洁, 切片时用力均匀, 厚度约4μm～5μm, 特殊要求时, 可达到3μm, 切好的组织在干净的玻片上粘附后立即放入提前配制好的冰冻切片固定液中及时固定1min～2min[2]。;染色和封片 切片后做快速HE染色, 苏木素染色过程需加热进行。这样做出来的快速切片镜下观结构完整、平坦、无皱折, 细胞核与细胞质染色色泽鲜艳, 对比清晰, 细胞无肿胀, 无收缩, 近似常规石蜡切片[3]。;;冰冻切片的优缺点; 缺点 ： 1．不容易做连续切片。 2．切取的组织不能过大，组织过大不容易冻结或者组织冻结不均，影响切片及染色效果。 3．不容易制作较薄的切片。 4．组织块在冻结过程中容易产生水的结晶而影响细胞的形态结构及抗原物质的定位，并且组织结构也不如石蜡切片清晰。;冰冻切片的应用 ;（5）显示组织中的脂肪和脂类物质，这常见于某些病例如脂肪瘤及肉瘤，某些科研等。 　　 （6）某些酶的显示如ATP酶，琥珀酸脱氢酶等。 　　 （7）神经病理学技术中的某些染色法如：Eager氏法，Marchi氏法，Cajal氏法，Hortega氏法和Holzer氏法等。 　　 （8）对某些物质所进行的免疫荧光的研究。;