黄曲霉测定选编.ppt

;黄曲霉毒素的测定 ; 黄曲霉毒素属剧毒物质，其毒性比氰化钾还高，也是目前最强的化学致癌物质。其中AFT B1的毒性和致癌性最强，其在食品中允许量各国都有严格规定。AFT主要污染粮油及其制品，如花生、花生油、玉米、大米、棉籽等被污染严重。;黄曲霉毒素允许量标准;一、原理;二、试剂、材料 1、仪器校准溶液； 1.1、零点校准液 1.2、500校准液 2、色谱纯甲醇 3、黄曲霉毒素B1荧光增强剂 4、黄曲霉毒素B1免疫亲和微柱 5、二次蒸馏水或超纯水 6、色谱纯石油醚或重蒸石油醚 ; 7 提取液即70%甲醇水溶液（含4%氯化钠）：40 g氯化钠用适量水溶解，加入700 mL色谱纯甲醇，用水定容至1000 mL 8色谱纯石油醚或重蒸石油醚 9 提取液即70%甲醇水溶液（含4%氯化钠）：40 g氯化钠用适量水溶解，加入700 mL色谱纯甲醇，用水定容至1000 mL； ; 三、仪器设备 1、NYART-1 型黄曲霉毒素B1快速测定仪 2??负压抽滤装置 3、旋涡混合器 4、微孔过滤膜（聚偏氟乙烯，F型，孔径0.45μm） 5、试管架（8孔） 6、慢速定量滤纸 7、50mL具塞玻璃试管：直径12 mm ，长 75mm，无荧光特性 ;8、10mL具塞玻璃试管 9、10 mL移液管 10、1000μL微量取样器 11、200μL微量取样器;四、操作步骤; 震荡混匀后静置分层2-3分钟，用移液器把上层的石油醚-油取出去掉，从大试管的底部准确取下层溶液3 mL，并加入8.0mL纯水稀释，混匀，用0.45μm 有机相滤膜过滤，取滤液9mL准备过亲和微柱。 ;2、样品提取液纯化; 使样品提取液以1.5mL/min流速通过微柱，用移液器取7.0mL（3：2：2）超纯水分三次淋洗过柱*，至亲和微柱的微球层上部剩余一点溶液，停止抽滤，弃去全部流出液。尽量从底部准确加入1 mL色谱纯甲醇洗脱（流速约为1 mL/min*）收集全部洗脱液于玻璃试管或比色皿中（此步可以全部抽空），准确加入1 mL超纯水混匀，盖上比色皿盖，准备在速测仪上进行测定。;备注：;3、黄曲霉毒素B1含量的测定;4、测定结果