_型单纯疱疹病毒糖蛋白D的晶体结构解析_英文_.pdfVIP

生物工程学报 Chin J Biotech 2011, October 25; 27(10): 1499?1506 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn ?2011 CJB, All rights reserved. 医学与免疫生物技术 II 型单纯疱疹病毒糖蛋白 D 的晶体结构解析 陈竹君 1,2，逯光文 2，齐建勋 2，许翔 1,2，张娜 2，严景华 2，王荣富 1 1 安徽农业大学生命科学学院，合肥 230036 2 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101 摘 要: II 型单纯疱疹病毒 (HSV-2) 糖蛋白 D (Glycoprotein D，gD) 在介导该病毒入侵到宿主细胞中起着关键作用。 为了更好地研究 gD 在病毒侵入过程中的作用机制，利用杆状病毒表达系统表达了 gD 胞外部分区域 (1~285 aa)，通过 Ni-NTA 亲和层析以及分子排阻层析纯化后，得到的带 His 标签的分泌型可溶蛋白，用悬滴法对该蛋白进行了晶体筛选， 获得了高质量的晶体。晶体生长条件为 0.1 mol/L Hepes 缓冲液 (pH 7.2)，5％ (V/V) 2-甲基-2,4-戊二醇 (MPD)，10％ PEG10000，18 ℃。晶体能够衍射到 1.8 ?，属于 P21 空间群，晶胞参数为 a=63.6，b=55.4，c=65.3 ?，β=96.3°。该晶 体的获得将为进一步研究 gD 的结构提供了基础，也为 gD 等同类囊膜蛋白的表达、纯化及结构研究提供了重要的参考。 关键词: 杆状病毒表达系统，纯化，II 型单纯疱疹病毒，糖蛋白 D 结晶 X-ray diffraction analysis of glycoprotein D from Herpes simplex virus type 2 Zhujun Chen1,2, Guangwen Lu2, Jianxun Qi2, Xiang Xu1,2, Na Zhang2, Jinghua Yan2, and Rongfu Wang1 1 College of Life Science, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China 2 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China Abstract: Glycoprotein D (gD) of Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) is a key factor mediating the entry of HSV-2 into host cells. In order to explain the mechanism underlying the gD-mediated receptor-binding and viral entry, we performed a structural study on HSV-2 gD. The ectodomain of the gD protein en