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本科生毕业论文开题报告书 题目名称 硅酸盐细菌的分离筛选和 纯化 学生姓名 郑一凡 学号 20064073022 学 院 生物资源与环境科学学院 专业年级 06级生物工程1班 指导教师 彭清静 职称 教授 填写时间 2010年3月31日 一 、选题的依据： 硅酸盐细菌又称钾细菌, 是一类特殊的细菌。这类细菌能分解岩石矿物, 把其中植物不能利用的养分释放出来。 自然界中含钾素很丰富的长石和云母等硅酸盐矿物, 是组成地球表面岩石和土壤的主要成分(占 60% 以上)。这些矿物虽然含有丰富的钾素, 可是并不能为植物所利用, 因为它们都是很稳定的矿物。但是, 有些细菌能分解稳定的矿物, 把其中对植物有用的钾素释放出来, 硅酸盐细菌即属此类。 硅酸盐细菌研究已有 80 多年历史, 这类菌可分解土壤中难溶的磷、 钾, 此类菌发酵液中有激素类物质,在植物根际形成优势种, 可抑制其它病原菌生长, 达到增产效果。这类菌能分解土壤矿物, 在瓷业中作添加剂，还可用来处理污水。 其代谢产物如多糖、 有机酸、 蛋白质对作物有增产效果。 已经发现的硅酸盐细菌有胶冻样芽孢杆菌(Bacil—lus mucilaginosus)和环状芽孢杆菌(B. circulans)等。李凤汀等人在1997年报道了分离到硅酸盐细菌HM 8841菌株, 经工业发酵制成菌剂, 使农作物提高产量。 本论文通过分离、 收集硅酸盐细菌, 丰富菌种资源库, 筛选高效解钾菌, 不仅具有理论意义, 而且, 在菌肥生产及农业生产上也有十分重要的应用价值。 二、研究内容 本课题主要目的是分离筛选出具有解钾作用的硅酸盐细菌，并对筛选出的菌种纯化以利于保存。研究的主要内容有： 1、 硅酸盐细菌培养基的配制； 2、分离筛选硅酸盐细菌； 3、硅酸盐细菌的纯化； 4、高效解钾硅酸盐细菌的筛选。 三、研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析 研究方法：以钾长石粉为惟一钾源的硅酸盐细菌选择性培养基筛选能够降解土壤中钾元素的细菌.利用梯度稀释分离法和平板划线分离法对其中的细菌进行筛选并纯化。用纯化的细菌进行培养，利用ICAP仪器检测钾元素的含量，筛选高效解钾菌株。 技术路线：土壤样品稀释液制备 → 涂布接种 → 恒温培养 → 定期观察记录 →挑菌落纯化菌株 →ICAP仪器检测 实验方案： 1、土壤样品稀释液制备：所取材料为吉首大学内土壤 2、涂布接种：按梯度配制的稀释液接种到培养基上进行恒温培养 3、初次筛选：在平板上挑选大部具有一定特征的菌落进行纯化培养 4、经过两次的纯化后，得到纯的菌落 5、用纯菌株配制的检测液用ICAP仪器检测，从而筛选出高效解钾菌株 可行性分析：主要运用微生物的一些基本实验方法，操作简单，但需要细心和耐心。指导老师彭清静教授曾经做过此方面的研究工作，具有丰富经验，能很好的指导我完成论文。实验室也具备该论文实验的条件。 四、进程安排和采取的主要措施 第1阶段：（2009年11月）论文选题　　?  第2阶段：（2009年11月至12月）?查询资料文献，设计实验方案，准备实验材料 第3阶段：（2010年1月至3月）根据方案完成实验内容 第4阶段：（2010年4月至5月）在导师的指导下修改论文并完成论文 五、主要参考文献（不少于10篇） [1]　连宾.硅酸盐细菌的解钾作用研究[M].贵阳:贵州科技出版社,1998. [2]周德庆.微生物学教程[M].北京:高等教育出版社,1993. [3]俞大绂,李季伦.微生物学[M].北京:科学出版社,1985. [4]中国科学院微生物研究所细菌鉴定分类组编.一般细菌常用鉴定方法[M].北京:科学出版社,1978. [5]王大耜.细菌分类基础[M].北京:科学出版社,1977. [ 6 ]　唐亮, 张进忠,于萍萍,等.硅酸盐细菌的分离、 纯化、 鉴定及生物学特性研究 \ [ J \ ].山东农业科学, 2008 (1) : 71 - 73. [ 7]　胡开辉.微生物学实验 \ [M \ ].北京:中国林业出版社, 2004: 95 - 97. [8]李凤汀,郝正然,杨则瑗.硅酸盐细菌HM8841菌株解钾作用的研究[J].微生物学报,1997,37(1):79-81. [9]刘光华,林洋,黄昭贤.硅酸盐细菌解钾兼拮抗活性菌株的筛选[J].应用和环境生物学报, 2001,7(1):66-68. [10]　连宾.硅酸盐细菌GY92对伊利石矿粉释钾作用研