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浅析小麦7OE亚基导入和揉面特性的论文.doc
浅析小麦7OE亚基导入和揉面特性的论文
摘要:利用195份矮败小麦与津强5号杂交得到的高代品系,研究了7oe亚基在其中的分布,探讨7oe亚基材料与揉面特性之间的关系。结果表明,195份材料中有6份材料扩增出447 bp的片段,占所检测品系的3.07%。7oe亚基对小麦的揉面特性部分指标有显著的正面影响,峰值高度、8分钟带宽在有无7oe基因间变异系数差别较大,含7oe亚基材料与非7oe亚基材料在8分钟带宽这一指标达到极显著差异。7oe亚基对改良小麦品质作用较大,8分钟带宽可作为品质分析的重要指标之一,此标记特异性较好,可用于中国小麦的品质改良。
关键词:矮败小麦; bx7oe;揉混特性;分子标记
小麦贮藏蛋白决定小麦的品质特性,决定面团的弹性和延伸性。高分子量麦谷蛋白亚基(hm,行距30 cm,5 cm点播。对其中9份农艺性状优良的非7oe亚基和6份含7oe亚基材料于2010年进行进一步扩繁,分析其揉混特性。
1.2 基因组提取
采用sds法提取小麦基因组dna[9]。每份材料分别提取二粒种子的dna,利用紫外分光光度计检测dna浓度,终浓度调整至20 ng·μl-1。
1.3 sts标记检测
利用ragupathy等[8]开发的显性sts标记检测bx7oe基因。引物由天津润泰科技发展有限公司合成。
标记(重复片段与逆转座子左边结合引物):tabac1215c06-f517:5-acgtgtccaagctttggttc-3,
tabac1215c06-r964:5-gattggtgggtggatacagg-3;
pcr反应体系为20 μl,含10×pcr buffer 2 μl,d ntp(a、t、c、g)各200 μmol·l-1,每条引物1 μl (10 mmol·l-1),taq dna聚合酶(takara)1 u,模板dna 50 ng。标记1的pcr反应程序为:94 ℃变性5 min;94 ℃变性30 s,63 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,35个循环;72 ℃延伸5 min。
pcr扩增产物以1.5%的琼脂糖凝胶电泳分离检测,缓冲液体系为1×tae溶液,180 v电压电泳30 min,溴化乙锭染色后,用gel doc xr system扫描成像并存入计算机。
1.4 制粉方法
采用德国brabender senior试验磨按aacc26-21a方法制粉。
1.5 揉混特性检测
由美国national公司生产的揉混仪采用10 g揉面钵
按aacc54-40a方法测试,重复2次,取平均值。
1.6 统计方法
采用dps统计分析软件进行显著性比较。
2 结果与分析
2.1 bx7oe 的sts标记检测
标记tabac1215c06-f517/r964 在含bx7oe基因的材料中可扩增出一条447 bp的片段,在不含bx7oe基因的材料中无pcr扩增产物。6份材料扩增出447 bp条带,占所检测品系的3.07%。
2.2 揉混特性检测
对9份田间农艺性状表现好的未带有bx7oe品系和6份带有bx7oe品系进行揉混图测定,图2为15份材料中2个材料的揉混特性检测,其中图2(a)为带有bx7oe基因的材料的揉混图,图2(b)为未带有bx7oe基因的材料的揉混图。
将9份非bx7oe品系和6份带有bx7oe品系的主要品质性状平均值、变幅和变异系数列于表1。由表可以看出,有与无7oe品系的峰值时间分别为4.25和3.89,变幅分别为2.79~5.47和3.3~4.81,变异系数为22.7%和14.1%,说明基因间变异系数差异较小;有与无7oe品系峰值高度的分别为63.618和70.900,变幅分别为55.898~71.947和66.929~74.111,变异系数分别为9.5%和3.9%,说明基因间变异系数差异较大;有与无7oe品系的峰值宽度分别为32.761和27.388,变幅分别为26.279~37.322和19.402~34.490,变异系数分别为13.7%和19.9%,说明基因间变异系数差异较小;有与无7oe品系的8分钟带宽分别为15.469和8.425,变幅分别为8.243~19.472和7.601~10.135,变异系数分别为26.6%和8.7%,其中有7oe品系间变异较大,无7oe品系间变异较小,说明基因间变异系数差异较大,有与无7oe品系的峰值能量分别为201.271和182.510,变幅分别为175.962~240.125和160.267~213.949,变异系数分别为为16.3%和11.9%,说明基因间变异系数差异较小。
从表2中可以
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