3.高效液相色谱仪流程及主要部件选读.ppt

仪器分析课程讲义;目录;§3-6 高效液相色谱流程;§3-6 高效液相色谱流程;一、 高压输液泵 用于输送流动相，由于色谱柱很细、为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（10μm）、流动液的扩散系数远小于气体，故液体的流动相高速通过时，液体流动时阻力很大，必须要有很高的柱前压力。 压力：150～350×105 Pa，高压、高速是高效液相色谱的特点之一。 流量稳定（影响重现性及分析精度）、流速可调 应具有压力平稳、脉冲小、耐腐蚀等特性;高压泵按其性质可分为恒压泵、恒流泵两类;§3-7高效液相色谱仪主要部件(2)梯度淋洗装置; (2)梯度淋洗装置 外梯度: 利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。 内梯度: 一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。 ;§3-7 高效液相色谱仪主要部件;§3-7 高效液相色谱仪主要部件;(5) 液相色谱检测器 紫外检测器: 应用最广，对大部分有机化合物有响应。 作用原理：被分析试样组分对特定波长紫外光的选择性吸收，组分浓度与吸光度的关系遵守比尔定律 特点： 灵敏度高； 线形范围高； 波长可选，易于操作； 对流动相的流速和温度变化不敏感； 应用可变波长检测器（流通池装有紫外或紫外可见分光光度计），以选择最佳检测波长。;§3-7 高效液相色谱仪主要部件;§3-7 高效液相色谱仪主要部件; §3-7 高效液相色谱仪主要部件;受紫外光激发后能够辐射出比紫外光波长较长的光 高灵敏度(比紫外检测器高两个数量级，达10-11g/ml)、高选择性； 对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；;§3-7 高效液相色谱仪主要部件(5) 液相色谱检测器e. 电导检测器（electrical conductivity detector）;§3-8 高效液相色谱的应用 application of HPLC1. 环境中有机氯农药残留量分析;§3-8 高效液相色谱的应用 application of HPLC2. 稠环芳烃的分析;§3-8 高效液相色谱的应用 application of HPLC3. 阴离子的分析;思考题 1．现需分离分析一氨基酸试样，拟采用哪种色谱？ 2. 在液相色谱法中，梯度淋洗适用于分离何种试样？ 3. 在液相色谱中，范氏方程中的哪一项对柱效能的影响可以忽 略 4. 对下列试样，用液相色谱分析，应采用何种检测器： （l）长链饱和烷烃的混合物 （2）水源中多环芳烃化合物。 5. 对聚苯乙烯相对分子质量进行分级分析，应采用哪一种液相色谱法？ 6.指出下列各种色谱法，最适宜分离的物质。 （l）气液色谱；(2) 正相色谱；（3）反相色谱；（4）离子交 换 色谱;（5）凝胶色谱；(6）气固色谱；(7）液固色谱。