显微鉴定的基本操作技能教程.pptx

第三章 显微鉴定的基本操作技能;第一节 显微标本片的制作;一、组织透化剂及应用： 1、组织透化剂：使细胞组织内含物溶解除去或透明清晰、色素氧化退色、皱缩细胞壁膨胀透明的试剂。 2、作用：（1）浸润作用。 （2）溶解、分解或氧化作用 ;3、常见的透化剂：（1）水合氯醛的特点：①能渗入组织细胞内，使干燥而皱缩的细胞发生膨胀；②能溶解多数组织内含物；③对观察草酸钙结晶极为适宜；④不加热可立刻观察菊糖。 ;二、组织封藏剂及应用： 1、组织封藏剂：能保持原制片要求，利于组织和细胞形状、颜色和内含物观察的溶液。;（2）稀甘油加入酚等防霉。 特点： ①保持2 ～3天； ②用稀甘油装片可观察糊粉粒、淀粉粒、油滴、树脂等； ③可在透化后滴加，以防水合氯醛析出结晶。;三、显微标本片： 1、粉末标本片：以粉末装片，粉末有细度要求。 2、表面标本片：3、切片标本片：中药鉴定中最多的一类。 4、解离组织标本片。 ;（2）粉末加水合氯醛溶液加热透化三次，加稀甘油封藏、盖盖玻片、清洁、观察。 2、永久性粉末标本片：做法较复杂，一般我们在外面购买的就是永久性装片，只要不损坏，可以一直看。 ;五、表面标本片：主要用于叶片、萼片、花瓣和雄蕊等表皮的表面特征观察。 1、整体封藏法：取材料剪取正反2小片，加水合氯醛加热透化3次，加稀甘油封藏，盖盖玻片，清洁，观察。 2、表皮撕离法：适用于较厚的叶片、萼片、花瓣等。;六、切片制片法：此类与粉末装片用得最多，有横切和纵切。 1、机器切片法：生活中很少用，只有生产厂家大量生产时运用。;软化方法： ①在吸湿器中放置12 ～24h。 ②过硬，水浸或煮12h。 ③特硬，高压锅煮20min。如天麻。 ④过软，浸入高浓度乙醇中20min。;软化注意事项： ①需观察糊粉粒、黏液、菊糖等水可溶性的物质的，不可与水接触。 ②需观察挥发油、树脂等，不能与高浓度乙醇或其他有机溶剂接触。;（2）材料的分割：切薄片。 （3）材料的挟持：方便切片，常用胡萝卜、马铃薯。 （4）徒手切片刀：双面和单面，双面切较柔软，单面切较硬，单面应用较多。;（5）持刀方法：右手持刀，刀身放平，刀口向切片者。 （6）切片：材料和刀口蘸水，切掉不整齐一段，同左前外方向右内方迅速拉切，臂用力。 （7）取片：合乎需要的立即浸入水中。 ; ;2、供试样置于试管中，加硝铬酸试液适量，放置，倾去酸液，加水洗，放于载玻片上，用解剖针撕开，加稀甘油，盖上盖玻片。 ;第二节 显微测量法;3、两尺的关系及应用：台微尺是不变的，每小格10um；目微尺随目镜和物镜的变化而变化。;（4）移动台微尺，使目微尺零端与台微尺刻度的某刻度线相重合。 （5）再找两尺的第二条重合刻度线，数两条重合线间两尺的小格数，记录。 （6）计算出目微尺每一格在该物镜条件下相当的长度（um）标定值 =台微尺小格数×10um/目微尺小格数。 ;5、测量方法： （1）将需测量的载玻片放于载物台上。 （2）用目微尺测量目的物的小格数，记录。 （3）计算：实际长度um=测得小格数×标定值;第三节 显微绘图法;（4）图中各部分用阿拉伯数字表示，在图下端注明标号名称。 3、绘图用具：16开白纸或A4白纸。铅笔。;4、绘图：图的类型一般分粉末图及组织图。 （1）粉末图：绘出其粉末特征。（2）组织详图：较详细，需要所有组织全部绘出，较难，一般不绘此种图。;第四节 ???用显微化学分析;二、细胞内含物质性质的鉴别： 1、淀粉粒：（1）加碘试液显蓝色或紫色。（2）用甘油醋酸试液装片，末糊化的在显微镜下显偏光。;（2）加90%乙醇，脂肪油和树脂不溶解，挥发油溶解。 4、糊粉粒：（1）加碘试液，显棕色或黄棕色。;;1、显微标本有哪些制法？;