气相色谱法测定奶粉中的反式脂肪酸含量.PDFVIP

北京东西分析仪器有限公司 气相色谱法测定奶粉中的反式脂肪酸含量 一、方法提要 本实验室根据国标 GB 5413.36-2010 《婴幼儿食品和乳品中反式脂肪酸的测 定》中提供的方法对奶粉中反式脂肪酸含量进行测定。 实验中首先用有机溶剂对奶粉中的脂肪进行提取，然后再在碱性条件下对提 取的脂肪进行甲酯化，形成脂肪酸甲酯。最后，再用配有氢火焰离子化检测器的 气相色谱仪分离顺式脂肪酸甲酯和反式脂肪酸甲酯，并进行外标法定量。 二、试剂及标准溶液配制 石油醚：沸程 30 ℃～60 ℃。 乙醚：分析纯。 95 %乙醇：分析纯。 正己烷：色谱纯。 氨水：25 %～28 %。分析纯。 氢氧化钾：分析纯。 甲醇：分析纯。 无水硫酸钠：分析纯。 脂肪酸甲酯标准品：反-9-十八碳一烯酸甲酯（C18:1-9t）、反-9，12-十八碳二 烯酸甲酯（C18:2-9t，12t），购自百灵威试剂有限公司。 4 mol/L 氢氧化钾-甲醇溶液：称取 26.4 g 氢氧化钾，溶于约 80 mL 甲醇中。 冷却至室温，用甲醇定容至 100 mL，加入约 5 g 无水硫酸钠，充分搅拌后过滤， 保留滤液。 标样配制： 反式脂肪酸甲酯标准贮备液：浓度分别为 10.0 mg/ mL。称取 100 mg（精确 到 0.1 mg）反-9-十八碳一烯酸甲酯标准品和反-9，12-十八碳二烯酸甲酯标准品， 分别用正己烷溶解并定容至 10.0 mL。放入冰箱在-15 ℃以下保存。 反式脂肪酸甲酯标准中间液：浓度分别为 1.0 mg/ mL。分别吸取两种反式脂 肪酸甲酯标准储备液 5.0 mL 加入同一 50 mL 容量瓶中并用正己烷定容。临用前 1 北京东西分析仪器有限公司 配制。亦作为标准曲线最高浓度。 反式脂肪酸甲酯标准工作液：临用前配制。分别吸取反式脂肪酸甲酯标准中 间液，0、2.0、6.0、8.0、10.0 mL 于 10 mL 容量瓶??，用正己烷定容，此浓度即 为 0、0.2、0.6、0.8、1.0 mg/mL 的标准工作液。 三、仪器及工作条件 恒温水浴：40 ℃～80 ℃ 离心机：转速≥4000 转/分钟 分析天平：感量为 0.1 mg 涡旋振荡器 旋转蒸发器 毛氏抽脂瓶 GC4000A 气相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司） GC 仪器条件： 色谱柱：HP-88 0.25 mm×100 m×0.20 μm 汽化室温度：250 ℃ 柱箱温度：初时温度 120 ℃ 三阶程升到 230 ℃. FID 检 测器温度：300 ℃ 载气：高纯 N2 分流比：70:1 柱流速：1mL/min 进样量：1μL 程序升温条件： 表 1 GC 程序升温条件 升温速率（℃/min） 温度(℃) 保持时间（min） 120 0 10 175 10 5 210 5 5