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实验三 观赏植物产品采后乙烯释放特性测定 一、实验目的和要求 乙烯（ethylene）是植物内源激素之一，以气体形式存在，对植物生长发育的多个过程有重要影响。准确测定乙烯释放量，对认识乙烯在植物抗逆生理、发育生理、开花生理中的作用有着重要的意义。通过本试验，要求同学们能够了解气相色谱法测定乙烯生成量的基本步骤，了解月季切花不同器官乙烯生成量的基本情况。 二、实验原理 气相色谱法测定乙烯具有灵敏度高、稳定性好等优点。色谱仪中的分离系统包括固定相和流动相。由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同，因此各种物质的分配系数（或吸附能力）不一样。当含混合物的待测样（含乙烯的混合气）进入固定相以后，不断通以流动相（通常为 N2 或He），待测物不断地再分配，最后，依照分配系数大小顺序依次被分离，并进入检测系统得到检测。检测信号的大小反映出物质含量的多少，在记录仪上就出现色谱图。要使待测物得到充分的分离，就需要一种合适的固定相。乙烯往往与乙炔、乙烷难以分离，目前多用 GD 502 作为固定相。 三、实验材料 月季切花 四、实验仪器和药品 乙烯标准气体，气相色谱仪（ Shimadzu GC 17A ），数模转换器（Shimadzu CBM101），电脑，空气压缩机，GC测气瓶和进样针。 五、实验步骤 1. 材料处理：将取试验材料茎、叶、花（分成萼片、花瓣、雄蕊、雌蕊、子房和花托），密闭于测气瓶中，25℃密封30min。 2. 色谱仪启动 启动步骤如下： 1）检测仪器各部件是否复位。若没有，需复位。 2）插上电源，依次打开电脑、色谱仪、数模转换器电源开关。 3）打开流动相（N 2），然后打开仪器上的 Flow键，将流速调至 50 mL/min （管道 1），通气15min。 4）调节柱温至55 ℃，将进样口和检测器温度分别调至 110 ℃和160 ℃（应先调节进样口和检测器温度，待其温度达到要求后再升柱子的温度；检测器温度需大于进样口，并且需在120 ℃以上）。 5）打开空气压缩机开关，调节适当的量程和衰减（range and attenuation），一般调至峰面积最小值为100，衰减为1。 6）打开钢瓶氢气阀，调压力为 1.0 kg/ cm2（两管道一样），同时将空气压力调至 0.5 kg/cm 2 。 7）点火：通入空气和氢气数分钟后，按点火键 ，氢气即可在燃烧室燃烧，在点火并点着时，可以看到基线向上移动。 8）条件选择：选择键打到2，并将空气压力调至 10kg/cm2，氢气调至 0.5~0.7 kg/cm2 之间（两管道一样）。待基线稳定后即可正式测定。 3. 测定 1）取一定浓度（μL/L，以空气作为稀释剂）、一定量（100~1000μL ）的标准乙烯进样，并注意出峰时间。待乙烯峰至顶端时即为乙烯的保留时间，重复 3~4 次，得到平均值。该平均值即作为样品中乙烯定性的依据之一。 2）取同样量的待测样品，注入色谱柱（进样）。待样品峰全部出完后，即可做下一个样品。 3）定性： A. 外标法定性：样品中与标准乙烯保留时间相同的峰，即为样品乙烯峰。 B. 内标法定性：在得到某一样品的色谱图后，向该样品中加入一定量的标准乙烯进样，若某峰增高，该峰即为样品中乙烯峰。 4. 关机步骤 待得到所有样品色谱图后，可关机，关机步骤如下。 1）关掉氢气总阀。 2）关掉空气压缩机。 3）将量程或衰减复位，选择键打到 OFF 。 4）关掉电脑。 5）待 H2、N2全部排完后，将所有阀复位。 6）关掉主机电源，并拔下插头。 （ μL/L ） [μL/ （ g * h ）] 六、作业 1）根据实验结果绘制??器官乙烯生成量图。 2）气相色谱法测定乙烯含量过程中应注意些什么 ？ 3）思考为何要先调节进样口和检测器温度，待其温度达到要求后再升柱子的温度；为何检测器温度需大于进样口，并且需在120℃以上？