鹅蛔虫ITS+rDNA的分子特征及种类分析.pdfVIP

动物医学进展，２０１７，３８（４）：１９－２３ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 鹅蛔虫ＩＴＳ ｒＤＮＡ 的分子特征及种类分析 李 欣，田守龙，何柳芬，刘百强，贾 佳，任邵娜，蒲文珺，张浩吉＊ （佛山科学技术学院动物医学系，广东佛山 ５２８２３１） 摘 要：为探究从广东省清远的鹅体内采集的蛔虫（Ａｓｃａｒｉｄｉａ ａｎｓｅｒｉｓ）的种类，对临床采集的鹅蛔虫样 品，在形态观察的基础上，用保守引物 ＮＣ５和 ＮＣ２扩增鹅蛔虫的ＩＴＳ ｒＤＮＡ 基因片段，将扩增产物经克隆 测序后，获得大小为１ ００９ｂｐ的鹅蛔虫ＩＴＳ ｒＤＮＡ 基因序列（ＧｅｎＢａｎｋ登录号为 ＫＣ９０５０８２）。序列比对和 系统进化分析表明，鹅 蛔 虫 ５．８ＳｒＲＮＡ 基 因 与 ＧｅｎＢａｎｋ 收 录 的 鸡 蛔 虫 （登 录 号 为 ＡＪ００１５０８）同 源 性 为 ９６％，而与不同地理株的鸽蛔虫的同源性在９１％～９６％之间；禽蛔科的鸡蛔虫、鸽蛔虫和鹅蛔虫同一进化分 支，鹅蛔虫、鸡蛔虫和鸽蛔虫处于各自的独立进化分支。上述证明，鹅蛔虫是不同于鸽蛔虫的一个独立有效 种，在系统发生关系上与鸡蛔虫更亲近。 关键词：鹅蛔虫；内转录间隔区核糖体 ＤＮＡ；聚合酶链反应；序列分析 中图分类号：Ｓ８５２．７３１；Ｓ８５８．３３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００７－５０３８（２０１７）０４－００１９－０５ 鹅蛔虫（Ａｓｃａｒｉｄｉａ ａｎｓｅｒｉｓ）隶属于禽 蛔 科（Ａｓ－ 验对采集自广东鹅小肠的鹅蛔虫在形态学观察的基 ｃａｒｉｄｉｄａｅ）禽蛔属的一种大型线虫，虫体寄生于鹅的 础上进行基 因 组 ＤＮＡ 抽 提，用 能 扩 增 虫 体ＩＴＳ 区 小肠，主要分布于 我 国 和 前 苏 联 的 一 些 地 区［１］。鹅 的通用引物进行 ＰＣＲ 扩增和序列分析，以期为鹅蛔 感染后主要症状为 食 欲 不 振、精神 沉 郁、羽毛松乱、 虫的分子鉴定提供依据。 下痢、消瘦，对养鹅业带来一定的危害。虫体种类鉴 １ 材料与方法 定是寄生虫病诊断和防控的 基 础，传 统 的 寄生虫鉴 １．１ 材料 定方法主要是依据虫体形态 学 特 征 进行鉴定，此法 １．１．１ 样品来源 试验所用的虫体均为２０１２年９ 简单通用，但是对形 态 相 近 的 虫 体、虫卵 以 及 幼虫， 月从广东省清远鹅场的临床病鹅的小肠里收集的鹅 形态学鉴定 具有 一 定 局 限 性［２－３］。隶 属 于 禽 蛔 科 的