第3节实验与应用.pptVIP

;讨论;一、样品的制备 样品在溶液中测定， 固体转换为溶液 溶剂要求：1.对被测组分有良好的溶解能力 2.在测定波长范围内没有吸收 3.被测组分在溶剂中有好的吸收 峰形 4.无毒，不易挥发，价格便宜;二、仪器测量条件的选择 1.波长选择 选最大吸收波长λmax为测定波长 ;2.吸光度范围的选择 光源不稳定、读数不准确、实验条件偶然变动 测量误差 浓度较大或较小时，相对误差较大 ;;三、显色反应条件的选择; b.显色剂用量的选择 方法：固定被测组分浓度和其他条件，然后加入不同量的显色剂，分别测定吸光度A；吸光度A与显色剂用量CR的关系会出现如图所示的几种情况。选择曲线变化平坦处。;2.反应的pH （显色反应的重要条件 ）;确定pH的方法：固定溶液中待测组分和显色剂浓度，改变溶液(缓冲溶液控制)的酸度(pH) 绘制A～pH曲线，从中找出平坦部分为pH范围。;显色（发色）时间：显色反应完成所需时间 稳定时间：显色后有色物质色泽保持稳定时间;问题;讨论;讨论;;四、参比溶液的选择;3.样品参比 试样基体溶液在测定波长有吸收，且与显色剂不起显色反应，，按与显色反应相同的条件处理参比，只是不加显色剂。 4.褪色参比 显色剂、样品基体都有吸收，可以在显色剂中加入褪色剂选择性的与被测离子反应生成无色配合物（不含被测组分）;主要的几种干扰情况： 1. 共存离子本身有颜色：Fe3+、Cu2+ 2.干扰物质与显色剂或被测组分形成更稳定的配合物，使显色反应不能进行完全 3.干扰物质与显色剂形成有色化合物，在测定条件下有吸收 ;消除方法;2.选择适当的掩蔽剂 选择掩蔽剂的原则是： 掩蔽剂不与待测组分反应； 掩蔽剂本身及掩蔽剂与干扰组分的反应产物不干扰待测组分的测定。 3.选择适当的测量波长 4.分离;紫外-可见分光光度法的应用; 紫外-可见分光光度法可用于有机化合物的定性鉴定、结构推断和纯度检验。 1.未知化合物的定性鉴定 定性依据：吸收光谱的形状、吸收峰位置、摩尔吸光系数。 方法：相同条件下，测定未知物和已知标准物的吸收光谱，对比图谱。 目前最常用的标准图谱：萨特???标准图谱库;2. 有机化合物结构推断 ;3.化合物纯度检验;二、定量分析;单组分的定量分析;B.标准对照法;C.标准曲线法 方法：1.配制一系列不同浓度的标准溶液，以不含被测组分空白为参比溶液，测定标准系列溶液吸光度，以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程A=a+bC。 2.在相同条件下测定样品溶液的吸光度，从上述标准曲线得出的回归方程计算出浓度。;例题;解：以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标，绘制标准曲线，采用线性处理程序进行线性回归处理，得回归方程为：A=0.109×105C+0.0073, 相关系数r2=0.9994 标准曲线符合要求，将待测溶液吸光度代入回归方程，的试样浓度为:;; 紫外与可见分光光度法比较;*;谢 谢！