HIV-1整合酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达和定位.pdfVIP

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2017-04-26 发布于未知
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HIV-1整合酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达和定位.pdf

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昆明医科大学学报 ????，???：??— ??? ?????— ????／?? ??????????????? ????? ?????????????????? ???一?整合酶真核表达载体的构建及在 ????细胞中的表达和定位? 谷万港 ”，张丽? ，张旋?’? ???遵义医学院基础医学院免疫学教研室，贵州遵义 ??????；??昆明医科大学学报编辑部；?? 昆明? 医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室，云南昆明? ???????? ?摘要? 目的构建重组基因表达载体 ??????／??一????—??并观察其在 ????细胞中的表达．对 ???一?整合? 酶表达以后在细胞里的定位情况进行研究．方法? 通过 ???扩增和定向克隆技术构建重组真核表达载体? ??????／??一????—??．以 ?????????????????介导转染 ????细胞．细胞用 ?％的多聚甲醛固定以后，经过 ??对细胞? 核染色，整合酶抗体跟整合酶反应以后，用 ????标记的二抗进行孵育，用共聚焦显微镜观测整合酶在细胞中的? 表达情况．结果? 经过定向克隆和测序鉴定证实，重组真核表达载体 ??????／??一????—??构建成功．免疫荧光? 实验显示，?????????????????介导质粒转染 ????表达成功，整合酶主要定位在细胞核．结论 ???一?整合酶真核? 表达载体构建成功，转染以后，整合酶表达并且主要定位在细胞核．? ?关键词????一?；整合酶；细胞核；????? ?中图分类号?????．? ?文献标识码?? ?文章编号?????????? ????????— ????— ??? ???????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????? ??????????