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第 ??卷第 ?期? 生 物 加 工 过 程? ???.?????.?? ????年 ?月? ????????????????????????????????????????? ???.????? ???:??.????/?.????.????— ????.????.??.???? ?一乳 酸?古同?。±??菌 菊 糖 芽胞 乳杆 菌 ??— ?磷 酸 果糖 激 酶? 基 因在 大 肠 杆 菌 中的克 隆和 表 达? 郑? 璐?,柏 中中?,许婷婷?,何冰芳? ??.南京工业大学 生物与制药工程学院,南京 ??????;?.南京 中医药大学 基础医学院,南京 ???????? 摘 要 :以 ?一乳酸 高产 茵菊糖 芽胞乳杆 菌 ??— ?基 因组 ???为模板 ,通过 ???扩增得 到 ??????的磷酸果糖激酶? 基 因?? ?。氨基 酸序 列比对分析表 明 ,该磷酸果糖激酶 ?????与其他乳酸茵 ???具 有保 守的底物 结合位点 ,但是? 其变构效应物结合位点存在差异。将? 基 因克隆到表达载体 ??????上 ,获得 重组 茵 ?— ???一? 。进一 步通过? 诱导条件的优化 ,重组 茵的 ???比酶活达到 ?.????/??,是优化前的 ?.??倍。采用低温诱导 策略有助 于实现 菊糖? 芽胞乳杆菌? 基 因在 大肠 杆菌 中可溶性表达。? 关键词 :?一乳酸 ;大肠杆 菌;菊糖 芽胞乳杆菌 ;表达 ;优 化 ;磷酸果糖激酶? 中图分 类号 :????? 文献标志码 :?? 文章编号 :????—????????????—????—??? ???????????????????????????????????????????????????????? ???????????????????????????????????????????????? ?????????,???????????????,????????????,???????????? ??.??????????????????????????????????????????????????????,???????????????????????,??????????????,?????;? ?.??????????????—?
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