病毒免疫学选编.pptVIP

病 毒 免 疫 学 (硕士研究生用);分子病毒学的概念;主要研究内容: 病毒的分子结构与功能、病毒感染的分子机制、基因表达调控原理、抗病毒多肽物质的研制、病毒转基因载体的研究、病毒蛋白质工程、病毒性疾病的诊断和新病毒的发现等。 ;第一节病毒学的历史与进化;北宋年间（公元10世纪）我国就有了用人工免疫接种预防天花的记载。 到11世纪，天花接种在中国和印度已很普遍。公元7世纪，这一技术传入中东，并很快扩展全欧洲,接种的死亡率达到2％。但在18世纪天花导致的死亡人数占整体人群的25 ％，婴孩死亡率高达40％。 18世纪90年代英国医生Edward Jenner发明了“种牛痘”的方法预防天花，由于其副作用小而很快取代了天花接种，并一直沿用至今。 ;1885年huts Pasteur制备出第一个减毒病毒疫苗——狂犬病疫苗。它可以引起机体产生针对狂犬病毒有效的保护性免疫，却只引起轻微的症状。随着第一个病毒的发现，许多病毒疫苗如黄热病疫苗、流感疫苗等也被陆续发明。 ;二、病毒的发现;将这一类比细菌小、具有感染性和复制性的物质称作超滤病毒，后来简称为病毒（virus ）。 继烟草花叶病毒和口蹄疫病毒被发现以后，鸡白血病病毒和鸡实体瘤的病毒等 也陆续被发现。 ;人类病毒的确认; 在接下来的几十年中，又有另外一些人类病毒被发现。但由于实验室病毒操作的危险性和困难以及实验方法的落后，病毒研究进展缓慢。 典型的例子是流感病毒。流感引起的大瘟疫主宰人类历史超过100年，发生在1918年至1919年的流感夺去了超过两千万人的生命。但直到 1933年发现适合流感病毒扩增的宿主之后，才第一次分离出人流感病毒。 ;（三）噬菌体的发现;三、病毒学研究方法的发展;在上世纪初，鸡胚开始用于病毒的研究。它不仅是第一个繁殖培养病毒和高效分离病毒（特别是流感病毒和各种痘病毒）的体系，还是第一个定量分析动物病毒的体系。鸡胚的应用使病毒学研究出现了较大的进展，多种病毒也因此被分离鉴定。 ; 动物宿主体系至今仍应用于生产不能体外繁殖的病毒、研究病毒感染的病理作用、检测疫苗的安全性等。。 近年来，转基因动物或植物已用于研究病毒与宿主的相互作用。将病毒基因组插入生物体的 DNA中，使病毒蛋白质在转基因动物或植物中表达，可以在活的宿主体内研究单个或多个病毒蛋白的病理作用。随着转基因生物相关技术难点的解决，这种方法将得到越来越广泛的应用。 ;(二）组织培养技术;（三）血清学／免疫学方法;(四)超微结构的研究;X射线晶体衍射技术使在原子水平上测定病毒的结构成为可能，其前提是获得病毒结晶体。 20世纪50年代，测定了烟草花叶病病毒郁金香黄花叶病毒等植物病毒的粒子结构，发现了病毒粒子的两个基本结构：螺旋（helix）和二十面体形（icosahedron）。 结构不规则的病毒不能形成结晶，无法通过X衍射法进行研究。这类病毒中很多尚未有高清晰的原子结构图（如 HIV等）。一些大的病毒粒子（如牛痘病毒）包含成百上千种蛋白质，也无法用X一射线晶体衍射技术进行分析。;近来，核磁共振越来越多地用于测量大分子（包括核酸和蛋白质）的原子结构，但这种技术只能分析一些相对较小的分子（上限为30－40kD），无法分析完整的病毒颗粒。 ;化学分析方法; 将病毒表面的蛋白质用某些化学元素进行标记，可以研究蛋白质的哪些部位暴露于表面，哪些部分被粒子或质膜包藏。用交联试剂或具有一定长度的“手臂”的新合成试剂可以测定病毒中相互作用的蛋白质和核酸的空间关系。这些方法还被用来研究病毒粒子表面抗原位点的改变或丢失，协助建立病毒粒子的物理结构图谱。 ;电子显微镜技术;Watson和Crick的DNA双螺旋结构理论揭示了遗传物质的基本规律，分子生物学的发展极大地推动了分子病毒学的发展。20世纪60年代以来，DNA和RNA病毒的繁殖机制相继被阐明；亚病毒相继被发现；许多病毒的基因序列被测定；癌基因和抑癌基因被发现；某些病毒基因结构与功能的关系、基因表达调控原理以及蛋白质分子结构被阐明。 体外蛋白质合成和表达技术的应用;蛋白质与蛋白质之间相互作用的研究;生物芯片的应用及人类疾病蛋白组学的兴起等极大地促进了分子病毒学的发展。 ;病毒学发展史上的重大事件;1908发现鸡白血病病原可用无细胞滤液感染鸡来传代 V．Ellerman等 1909分离 Polio病毒 Landsteiner等 1919发现 RSV P． ROllS 1915发现噬菌体F．W．Twoft 1931用鸡胚进行病毒传代 GoodPasture等 1933鉴定了兔乳头瘤病毒 R．E．ShoPe 1934纯化噬菌体 M．Schlesinger ;1935获得TMV的结晶