长蛸ISSR-PCR优化反应体系的建立及优化研究.pdfVIP

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第 ??卷 第 ?期? 浙江海洋学院学报?自然科学版?? ???.??? ??.?? ????年 ?月? ????????????????????????????????????????????????????? ???.,????? 文章编号:????—????????????—????—??? 长蛸 ????—???优化反应体 系的建立及优化研究? 汤永磊 ,,周? 超?,祁鹏 志 ?,吴常文?,郭宝英? ??.浙江海洋学院海洋科学学院,浙江省海洋养殖装备与工程技术重点实验室,浙江舟山???????;? ?.华 中农业大学水产学院 ,湖北武汉 ???????? 摘 要 :以长蛸 ???为模板 ,利用 单因子试 验分别对影响长蛸 ????—???反应的 ???浓度 、???????聚合酶 、?? 、? ?????和引物的浓度进行了优化 ,并通过梯度 ???确定最适退火温度 ,最终确定长蛸最佳反应体 系和 ???扩增程序 为 :??? 体系 ,其 中包括? ???聚合酶 ?.???,??????????/?,???????.???????/?,引物 ?.??????/?,???模 板量约 ?????确立退? 火温度为 ??℃。利用所建立的 ????—???反应体系 ,通过对 ??份野生长蛸样本的检验 ,获得 了清晰 、重复性好 、多态性高的? 条带 ,研究结果对于把 ????标记技术 引入研究长蛸不 同地理群体遗传多样性和遗传结构具有重要意义。? 关键词:长蛸 ;????;体系优化? 中图分类号 :?????.?? 文献标识码 :?? ?????????? ????????????? ???????? ?????????????????? ??????????????????????? ?????????????,??????????,????????????,?????? ??.??????????????????????????????????????????????????,???????????????????????????????????????

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