CKD患者肾内小动脉ɑSMA的表达与颈动脉内膜厚度的关系.doc

CKD患者肾内小动脉ɑ-SMA的表达与颈动脉内膜厚度的关系 目的：通过研究各期CKD（Chronic Kidney Disease,）患者肾内小动脉α-SMA的表达程度的差异，肾内小动脉α-SMA的表达程度与颈动脉内膜厚度的关系，揭示肾组织α-SMA的表达与肾组织病变程度的关系。方法：选取63例CKD患者。按照eGFR分为3组，CKD1期病人26例，CKD2期病人21例，CKD3期病人13例，CKD4期病人3例，分别行PSA染色，PASM染色以及免疫组化染色，观察肾间质纤维化程度、肾内小动脉的表达程度。结果：1.肾内小动脉α-SMA的平均光密度：CKD1期组0.2816±0.0161；CKD2期组0.2681±0.0990；CKD3期组0.2172±0.0512，CKD4期组0.1916±0.0301,肾内小动脉α-SMA平均阳性面积百分比：CKD1期组22.2301±6.3452%；CKD2期组19.1032±9.3423%；CKD3期组14.3401±12.3427%，CKD4期组10.4049±11.6902%：各组之间两两比较均有统计学差异(P＜0.05）。2.肾小管损伤指数: CKD1期组0.1216±0.0161；CKD2期组0.1181±0.0390；CKD3期组2.2172±0.0541，CKD4期组3.1916±0.0401.前两组相比,肾小管损伤指数无统计学意义((P0.05),其余各组两两比较均有明显差异(P＜0.05）.3.颈动脉内膜厚度：CKD1期组患者0.9212±0.1401mm；CKD2期组1.6137±0.5014mm；CKD3期组2.2147±0.4116mm；CKD4期组2.8147±0.8016mm。各组之间两两比较均有统计学差异(P＜0.05）。结论：1.肾内小动脉α-SMA的表达的变化可能参与了CKD的发生发展。2.联合检测肾内小动脉α-SMA的表达程度与颈动脉内膜厚度的关系可为CKD患者发生心血管意外的可能性提供一定的依据。 关键词：慢性肾脏病；α-SMA；肾小管损伤指数： 颈动脉内膜厚度；心血管事件 近年来，在全球范围内的发病率逐年增加，有统计显示，我国南方大城市中，CKD 的患病率约为10%，北京40岁以上人中，至少有一项肾脏指标异常的人群达到了11%。CKD发病率随着肥胖、高血压、糖尿病人数的增加进一步升高。CKD如若未得到及时治疗，可呈进一步进行性发展，并进入终末期肾衰竭（End stage renal disease， ESRD）阶段，此时则需长期肾脏替代治疗; CKD还能够增加心血管疾病的发生率，是CKD的主要死因之一。因此控制并治疗CKD，已成为全球特别是发展中国家的主要任务，可极大减少ESRD发生率, 减轻社会经济负担。 1材料 1.1研究对象 1.1.1研究对象选择： 选??2012年3月至2012年9月在河北医科大学第二医院住院，经肾活检诊断明确为慢性肾脏病患者63例，其中CKD1期病人22例，CKD2期21例，CKD3期17例，CKD4期3例，留取肾组织石蜡切片备用。 慢性肾脏病的分期标准： 1期：肾损害：eGFR正常或升高[≥90ml/（min?1.73㎡）]。 2期：肾损害伴eGFR轻度下降[60～90ml/（min?1.73㎡）]。 3期：eGFR中度下降[30～60ml/（min?1.73㎡）]。 4期：eGFR明显下降[15~30ml/（min?1.73㎡）] 1.1.2入选标准： （1）年龄18周岁；（2）临床或病理诊断为肾实质性疾病； 2 方法 2.1 肾穿刺标本的处理 肾组织经过FAA固定后进行石蜡包埋后切片机连续切片，厚度为2um，在水浴箱中展片，组织充分舒展以后，载玻片捞取组织后放入恒温箱60度烤片。 3.2 肾组织的PAS染色步骤 （1）二甲苯脱蜡至水 （2）梯度酒精水化 （3）自来水清洗1分钟 （4）加高碘酸氧10分钟 （5）自来水清洗3分钟 （6）滴加shiff氏液10分钟 （7）自来水清洗3分钟 （8）Mayers苏木素染色6分钟 （9）自来水清洗3分钟 （10）1%的盐酸酒精分化2秒 （11）自来水清洗3分钟 （12）1%氨水返蓝20秒 （13）自来水洗3分钟 （14）梯度酒精脱水 （15）二甲苯1-2分钟 （16）中性树胶封片 （17）光镜下观察病理变化。 3.3、 PASM染色 （1）2μm切片常规脱蜡至水； （2）1%高碘酸氧化20分钟 （3）自来水冲洗； （4）现配制六胺银染色：60度温箱30min（随时镜下观察）； （5）自来水冲洗； （6）0.2%氯化金（5分钟）； （7）苏木素复染5分钟； （8）1%的盐酸酒精分化2秒； （9）Masson红复染2min，自来水洗； （10）快速脱水，透明，封片。