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大学分子生物学:dna复制
DNA的复制;第一节 DNA复制概貌;二、复制过程中的顺序性 复制从原点开始 边解链边复制 为什么不采取先将DNA全部解链, 然后再分别进行复制的方法? ;三、DNA的半不连续复制 ;;DNA只能从5′到3′方向合成 不能从两端同时复制 ;3,5-磷酸二酯键的形成;第二节 DNA的复制酶和相关蛋白;Roger, Kenneth, Sylvy, Arthur and Thomas. ;DNA聚合酶II:没有5′-3 ′外切核酸酶活性, 次要的DNA修复酶 DNA聚合酶III:是真正的DNA复制酶 多亚基 多层次组装 DNA聚合酶IV和V:参与SOS修复;;DNA聚合酶III的结构: α DNA聚合酶 ε 3’-5’核酸外切酶 θ 激活ε外切酶活性 τ 使核心酶结合为二聚体;结合γ复合物 γ 结合ATP δ 与β亚基结合 δ’与γ和δ亚基结合 χ 与SSB 蛋白结合 ψ 与χ和γ亚基结合 β sliding clamp(滑动夹环) ;β sliding clamp;二、解螺旋酶(helicase): A helicase is an enzyme that uses energy provided by NTP hydrolysis to separate the strands of a nucleic acid duplex ;三、SSB蛋白(单链结合蛋白) The single-strand binding protein?(SSB) attaches to single-stranded DNA, thereby preventing the DNA from forming a duplex 防止单链复性 维持单链刚性状态 避免单链降解 The SSB binds as a monomer, but typically in a cooperative manner in which the binding of one protein molecule makes it much easier for another to bind ;四、引发酶(primase): The primase is a type of RNA polymerase that synthesizes short segments of RNA that will be used as primers for DNA replication. 为什么DNA的合成需要RNA引物? ;五、旋转酶(gyrase ): a Type II topoisomerase, acts to overcome the torsional stress imposed upon unwinding by introducing negative supercoils at the expense of ATP hydrolysis. 复制叉前进带来扭曲张力 拓扑异构酶II:引入负超螺旋 ;六、DNA连接酶(DNA ligases ) DNA ligase makes a bond between an adjacent 3’-OH and 5’ -phosphate end where there is a nick in one strand of duplex DNA . 1、酶活化 2、AMP转移 3、3′-OH亲核攻击 ;第三节 DNA的复制过程;起始过程: The origin is initially recognized by DnaA that forms a large complex with DNA. A short region of A·T-rich DNA is melted. DnaB is bound to the complex and creates the replication fork. The first nucleotides of the new chain are synthesized into the primer ;(二)复制的延伸: 复制体:酶和相关蛋白在复制叉形成的超分子复合物;先导链和后随链的同时复制 Lagging template strand通过复制体形成一个环状结构,primase已经合成一条引物#2 随着冈崎片段的合成,环逐渐变大,直到#2片段末端接近前一冈崎片段的引物 复制体释放环,primase合成一个新的引物 ;(三)、复制的终止:;真核生物复制特点: 复制速度慢 基因组较大,有多个复制起点 在全部复制完成以前,起点不开始新一轮复制;真核生物DNA聚合酶: ;复制
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