复件微生物检测_第5章1.pptVIP

第五章 病原菌的检验;主要的食物导致的疾病;肠道杆菌;大肠埃希菌是肠杆菌科细菌中，从各种温血动物的肠道中检出率最高的菌种。 最早是由埃希（ Escherich）1895年在粪便中发现而命名，又称大肠杆菌（coli），在鱼类、两栖类、昆虫的肠道中也存在。 从新生儿开始就终生存在，与人体是共栖关系，人体供给它生长条件，而这类菌的代谢产物能抑制肠道内其它分解蛋白质的细菌的生长，减少蛋白质分解产物对人体的危害，并能合成VB,VK,供人体吸收利用。;是一种条件致病菌。当机体免疫力降低时，或侵入肠外组织，可引起肠道外感染，如肾炎、胆囊炎、胆结石、膀胱炎、肺炎、败血症等。 有些菌株致病性强，能直接导致肠道感染。 药品、食品中有无大肠埃希菌及数量多少，可判断药品、食品是否被粪便污染及污染的程度。如果检出该菌，表明被粪便污染，且有可能污染伤寒、痢疾或其他肠道致病菌;1.形态与染色 是两端钝圆的革兰氏阴性短小杆菌，有时近球形 （1.1-1.5）μm ×(2.0-6.0)μm 无芽孢，以周身边毛运动或不运动，某些菌株具有荚膜。;2.培养特性;3.生化特性;4.抗原结构;5.抵抗力 对热的抵抗力较强 在自然界中可存活数周至数月 对磺胺类、四环类等抗生素敏感 对煌绿染料比沙门氏菌敏感 耐胆盐 对漂白粉、酚、醛等敏感 ;毒素类型;致病性大肠埃希菌主要分为五类：;菌型;大肠杆菌O157;大肠杆菌O26;二、大肠埃希菌检查法;IMViC;;甲基红试验(methyl red test)：取培养物接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基，培养48h，沿管壁加入甲基红试剂5-6滴，液面呈鲜红色或橘红色为阳性。 原理：细菌发酵葡萄糖，在磷酸盐葡萄糖胨水培养基中，发酵产酸，使甲基红试剂变色而呈阳性反应。有的细菌可使pH下降至于4.5或更低；有的则使发酵产物脱羧而产生中性乙酰甲基甲醇，使pH回升至5.4以上。;乙酰甲基甲醇生成试验;;柠檬酸盐利用试验(citrate test)：取培养物接种于柠檬酸盐培养基，培养2-4天，斜面有菌苔生长，培养基由绿色变为蓝色时为阳性。 原理：柠檬酸盐利用培养基是合成培养基，不含蛋白胨和糖类，以柠檬酸钠为惟一碳源，磷酸二氢铵为唯一铵盐，细菌在柠檬酸盐利用培养基生长???柠檬酸钠被分解生成碳酸钠与水，使培养基pH升高，溴麝香草酚蓝指示剂显蓝色。;;硫化氢试验;血清学试验;;氧化酶试验;三、MUG-Indole检查法;2.检验程序;3.注意事项;四、肠毒素检验;间接法;结果判定：以酶标仪在492nm下测定吸光度OD值，待测样本OD值大于阴性对照3倍以上为阳性。或目测为橘黄色。 ;抗原竞争法检测ST;;;检样;快速检测;绿蓝色菌落为O157;;;