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新型实时荧光定量PCR
实时荧光定量PCR技术的原理及应用
(Real time Quantitative PCR);;;实时荧光定量PCR原理:实时原理;实时荧光定量PCR原理:实时原理;实时荧光定量PCR原理:定量原理;实时荧光定量PCR 原理 -- 扩增曲线;实时荧光定量PCR 原理 ---荧光阈值;实时荧光定量PCR 原理 ----Ct值;实时荧光定量PCR 原理 --Ct值的重现性;实时荧光定量PCR 原理 ------ 定量原理;实时荧光定量PCR 原理 ------ 定量原理;实时荧光定量PCR 原理 --------- 标准曲线;确定未知样品的 C(t)值
通过标准曲线由未知样品的C(t)值推算出其初始量;;非特异性荧光标记:
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特异性荧光标记:
2、TaqMan
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;;SYBR Green法 工作机理;;实时荧光定量PCR原理SYBR Green I熔解曲线分析;实时荧光定量PCR原理SYBR Green I融解曲线分析;SYBR Green 法 融解曲线分析;Cycle number;;SYBR Green 法 应用范围;SYBR Green 法 优缺点 ;与目标序列互补;TaqMan法 工作原理;TaqMan 法 PCR反应的建立;TaqMan法 优缺点;;?绝对定量(Absolute Quantification,AQ)
病原体检测
转基因食品检测
基因表达研究
?相对定量(Relative Quantification,RQ)
基因在不同组织中的表达差异
药物疗效考核
耐药性研究;绝对定量与相对定量的定义;绝对定量通过标准品定量;绝对定量:从荧光到拷贝数;;;;实时荧光定量PCR法--相对定量分析方法2:
双标准曲线法;实时荧光定量PCR法:实验要素1--样品;实时荧光定量PCR法:实验要素2--标准品;实时荧光定量PCR法:实验要素2--标准品;复管测试
●样品和标准品都要重复
●重复次数须遵循统计学要求
;;;;;;;;;实时荧光定量PCR技术的原理及应用
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