优质课多聚酶链式反应扩增DNA片段技巧.ppt

参与的组分;脱氧核苷酸结构式;O;;PCR(多聚酶链式反应）;;PCR原理;;生物体内DNA复制与PCR反应的区别;基础自主梳理;(2)子链的合成：①需要______；②合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 3．条件 (1)______模板。 (2)分别与模板DNA两条链相结合的两种引物。 (3)A、T、G、C四种______________。 (4)耐热的DNA聚合酶，一般用Taq DNA聚合酶。 (5)需要稳定的_____和能严格控制_____的温控设备.;二、PCR反应过程 PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为____、复性和延伸三步。 1．变性：当温度上升到______以上时，双链DNA解聚为单链。 2．复性：温度下降到_______左右，两种引物通过________________与两条单链DNA结合。 3．延伸：温度上升到_____左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在_______________的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。;三、操作步骤 准备→____→混合→_____→反应。 四、操作提示 1???为避免外源DNA等因素的污染，实验中使用的一些用具在使用前必须进行__________。 2．所用的_________和酶应分装成小份，并在－20 ℃储存。