细胞原代培养[Cellprimaryculture].pptVIP

细胞的原代培养 (Cell primary culture);背景资料;背景资料;1、成纤维细胞型： 胞体呈梭型或不规则三角形，中央有卵圆形 核，胞质突起，生长时呈放射状。 除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间充质起 源的组织，如心肌、平滑肌、成骨细胞、血管 内皮等常呈本型状态。 培养中细胞的形态与成纤维类似时皆可称之为 成纤维细胞。;2、上皮型细胞： 细胞呈扁平不规则多角形，中央有圆形核，细 胞彼此紧密相连成单层膜。生长时呈膜状移动， 处于膜边缘的细胞总与膜相连，很少单独行动。 起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生 物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮 型形态。;3、游走细胞型： 呈散在生长，一般不连成片，胞质常突起，呈活跃游走或变形运动，方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区别。4、多型细胞型： 有一些细胞，如神经细胞难以确定其规律和稳定的形态，统归于此类。;悬浮型： 胞体圆形，不贴于支持物上，呈悬浮生长。这 类细胞容易大量繁殖。 见于少数特殊的细胞，如某些类型的癌细胞及 白血病细胞。 ;原代细胞培养的一般方法: 植块培养法(explant culture) 分离(散)细胞培养法 (dissociated cell culture);一、心肌细胞、表皮细胞的培养 二、淋巴细胞的培养;心肌细胞、表皮细胞的原代培养;实验目的 ;实验原理 ;主要仪器： 纯水仪；离心机；CO2培养箱； 电热干燥箱；高压蒸汽消毒锅；过滤器及0.22 ?m滤膜； 超净台；眼科剪、镊；培养瓶；青霉素瓶；平皿；吸管；移液管；血球计数板;实验用品 ;实验用品 ;实验步骤 ;实验步骤 ;实验步骤 ;实验步骤 ;实验步骤 ; ? 严格无菌操作。 ? 植块培养时注意黏附，加液量不 可过多或过少，过多，会漂浮； 过少，会干死。;四、观察培养结果 培养2－3天，细胞从植块向外迁移，随着培养时间延长，在植块周围形成一圈细胞——“晕”，称之为生长晕(growth hallow)。;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;淋巴细胞的培养 (Lymphocyte culture) ;实验目的 ;实验原理 ;主要仪器： 纯水仪、离心机、CO2培养箱、 电热干燥箱、高压蒸汽消毒锅、过滤器及0.22 ?m滤膜、 超净台、培养瓶、离心管、吸管、移液管、血球计数板、一次性注射器;实验用品 ; 实验试剂： （1）RPMI 1640 培养液 （3）肝素钠（180 IU／ml） （5） PHA（2 mg/ml） （7）?5％NaHCO3 （9）? 2％碘酒棉球 （11） 1%台盼蓝;实验步骤 ;实验步骤 ;实验步骤 ;注意事项 ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;原细胞悬液细胞数/ml=n/4×10 000×m n: 4大格中的细胞总数 m: 稀释倍数;实验报告 ;Thanks !