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0405细胞系及细胞株的建立
Chapter 4 Animal Cell Culture;Section 5：细胞系和细胞株的建立;1. 取材;2. 原代培养;3. 建系过程;克隆细胞株 ;1. 细胞克隆技术(p59) ;2. 细胞克隆培养的技术方法;;;;3. 影响克隆形成率的因素; 原代培养的培养物中所含的细胞类型多而复杂。因此在培养初期，存活和生长的细胞类型也是多种多样的。所以再培养不仅仅是为了维持细胞不断地生长，而且是使培养物逐步成为具有增殖能力、特征专一、类型均匀的培养细胞，即细胞系(或株)。;1. 细胞系鉴定指标;2. 细胞系的鉴定方法;3）同工酶谱： 通常采用G6PD(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)、LDH(乳酸脱氢酶)、核苷磷酸化酶三种方法，根据条件选择。;4）细胞DNA遗传特征: 限制性片断长度多态性(restriction fragment length polymorphism RFLP) 是指那些在生物进化过程中，DNA序列发生某些中性突变，突变的结果是失去或获得一个酶切点，因此当基因组DNA用限制性???切酶酶切后，限制性内切酶片断加长或缩短；用同源的克隆DNA为探针可以探测出来。另外也可能在生物进化过程中DNA分子结构发生重排，使DNA碱基排列序列改变，影响内切酶切点,使内切酶酶切片断呈多态性。 一般采用Southern印迹杂交法检测。;;四、档案资料的建立及其管理;;细胞系或细胞株的命名
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