实验二十二显微镜下测量微生物细胞的大小.doc

实验二十二 显微镜下测量微生物细胞的大小 生物112 周泓兆 1102040226 目的 学习并掌握利用显微测微尺测量微生物大小的方法。 原理 因为微生物的个体通常只在显微镜下可见，所以其大小的测量也应在显微镜下进行。用来测量微生物大小的工具有目镜和镜台测微尺。镜台测微尺专用于校正目镜测微尺每格的长度，是中央部分刻有精确等分线的载玻片，全长为1mm，等分为100小格，每一小格长为10μm。目镜测微尺的刻度在一个略小于目镜内径的圆玻璃片上，有等分50小格和等分100小格两种，每5小格间有一长线相隔。当将此测微尺放在目镜内观察物象时，可同时看见物象和测微尺，但是配合不同放大倍数的物镜时，目镜测微尺每刻度间的长度会发生变化。所以，目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大小，使用前必须利用镜台测微尺进行校正。 材料 菌种：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae） 显微测微尺：镜台测微尺，目镜测微尺 其它：18×180mm试管分装9ml，10ml无菌水，无菌滴管，载玻片，盖玻片，吸水纸，擦镜纸，振荡器 实验步骤 校正目镜测微尺： 安装目镜测微尺：取出目镜，旋开透镜螺旋，将目镜测微尺刻度朝下放入目镜筒，然后旋好螺旋，插入显微镜筒； 置镜台测微尺：将镜台测微尺放在载物台上，使刻度面朝上； 校正：在高倍镜下观察，调准焦距，当看清镜台测微尺后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行，然后移动推动器，是目镜测微尺和镜台测微尺的某一区间的两条刻度线完全重合，再数出两条重合线间各自所占的格数，根据公式得到校正后的目镜测微尺每小格的长度。 目镜测微尺每小格长度（μm）= 制备菌悬液：取一环菌加入5ml无菌水中，充分振荡，待用。 制酿酒酵母水压片：取一洁净载玻片，在中央滴一滴菌悬液，小心盖上盖玻片，用吸水纸吸干多余液体，千万不要产生气泡； 测量酿酒酵母菌体大小：将酿酒酵母水压片放在载物台上，在显微镜下看清菌体后，转动目镜测量酵母细胞菌体的直径。 整理：取下目镜测微尺，擦净后收好。 结果与讨论 将目镜测微尺的校正结果填入下表。 目镜测微尺刻度的校正 物镜物镜倍数目镜测微???格数镜台测微尺格数目镜测微尺每格代表的长度（μm）高倍镜402462.5将高倍镜下的结果填入下表。 酿酒酵母细胞大小的测量 菌细胞编号12345678910平均值目镜测微尺格数2.9×1.22.5×1.02.8×1.62.4×1.12.6×1.32.4×1.22.5×1.62.3×1.12.6×1.22.7×1.32.57×1.26酵母细胞直径（μm）7.25×36.25×2.57×46×2.756.5×3.256×36.25×45.75×2.756.5×36.75×3.256.425×3.15班级数据如下： 酵母菌细胞大小长轴（μm）短轴（μm）下四分位8.24.2875最小值5.353.15最大值16.211.9上四分位10.19757.2中位数9.4755.95 1.实验时需要注意，放置目镜测微尺时需要刻度向下。 2.每次需要将目静测微尺旋转至与被测长度平行后才可读数。 3.制作水压片时不要滴加过多菌悬液，防止溢出。 4.在无法看清目镜测微尺刻度时，可以通过调整光圈大小使目镜测微尺清晰。