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乳酸菌论文：猪源乳酸菌对永生化猪小肠上皮细胞的黏附性研究 【中文摘要】益生菌是一类通过调控动物肠道微生物区系平衡,能有效地促进宿主动物健康生长的微生物活菌制剂。益生菌株只有黏附和定植在宿主肠上皮细胞上才能有效发挥作用,因此,益生菌的黏附特性及其机理研究成为备受关注的研究热点。目前黏附性研究的模型以肠上皮样细胞Caco-2细胞株、人结肠癌细胞株HT-29、各种原代培养的上皮细胞以及分离纯化的黏液为主,尚未见永生化正常肠上皮细胞为体外模型的研究报道。本研究以永生化猪小肠上皮细胞ZYM- SIEC02作为体外模型,以健康仔猪的粪便和不同肠段肠黏液样品中的乳酸菌为材料,探索乳酸菌的黏附性能、抗逆性以及对病原菌的黏附抑制作用,旨在为揭示益生菌作用机理提供依据。结果如下:1.从健康仔猪不同肠段内容物和黏液中分离筛选出12株乳酸菌,通过对永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02的黏附试验发现,各乳酸菌的黏附性存在显著差异(p 0.05),6株乳酸菌的黏附性较好,其中Y091231的黏附指数为(2903.25±83.33 )CFU/100细胞,Y091221的黏附指数为(2320.37±81.02 ) CFU/100细胞, Y224031的黏附指数为(1965.43±37.72) CFU/100细胞。总体来看,乳酸菌产酸性越强,黏附性越高。2.对黏附性良好的6株乳酸菌进行抗逆性试验,其中Y091231、Y224031和Y091221对高胆盐、低pH具有较强的耐受性。根据《伯杰氏细菌鉴定手册》和16 S rDNA序列测定,最终确定三株来自回肠黏液或内容物的乳酸菌分别为唾液乳杆菌、粪肠球菌和约氏乳杆菌。3.乳酸菌对肠道致病菌黏附抑制能力试验表明,三株乳酸菌对致病菌均具有很好的黏附抑制作用,但不同乳酸菌对不同致病菌的黏附抑制具有种属特异性,其中Y091231对大肠埃希菌C83921的黏附抑菌能力最强(99.4±3.17)%,Y091221对沙门氏菌的黏附抑制能力最强(97.1±2.04)%,Y091231对金黄色葡萄球菌的CVCC 2258黏附抑制能力最强(98.0±2.31)%。4.不同生长时期的乳酸菌对猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02的黏附能力存在明显差异,培养至稳定期(16h～20h)时的细菌黏附能力最强。 【英文摘要】Probiotics are live cultures of microbes,Which can altering the intestinal microbial balance to improve host healthy and growth. Probiotics have indeed shown to possess special health-promoting characteristics if they have the ability of colonization and adhesion.So,it’s a hot to study the mechanism of adhesion.In the present,the in vitro screening model in order to bowel epithelioid macrophages Caco-2 lines, people colon cancer cell, various original HT-29 for cultivating the epithelial cells and purification mucous primarily. There is no report about normal immortalization neonatal swine intestinal epithelial cell lines in this filed.In the present research, Isolated the probiotics strains from piglets’ excrement and different parts of fresh bowel.Took the Immortalization Neonatal Swine Intestinal Epithelial Cells ZYM-SIEC02 (abbreviation -n:SIEC)for the model , Discuss the adhesion, resistance and adhesion inhibition of pig Lactic acid bacteria. Des