转入WIF-1或5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化抑制骨肉瘤模型鼠的肿瘤生长程序.docVIP

www.CRTER.org 段飞，等. 转入WIF-1或5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化抑制骨肉瘤模型鼠的肿瘤生长 www.CRTER.org 段飞，等. 转入WIF-1或5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化抑制骨肉瘤模型鼠的肿瘤生长 PAGE 3990 P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org PAGE 3 P.O.Box 1200,Shenyang 110004 k 中国组织工程研究 第20卷 第27期 2016–06–30出版 www.CRTER.org Chinese Journal of Tissue Engineering Research June 30, 2016 Vol.20, No.27 ·研究原著· PAGE 3984 P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org 转入WIF-1或5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化抑制骨肉瘤模型鼠的 肿瘤生长 段 飞，李书忠，朱万平，康学华，张恒甲，代胜杰，田艳朋(青岛大学附属医院脊柱外科，山东省青岛市 266100) 引用本文：段飞，李书忠，朱万平，康学华，张恒甲，代胜杰，田艳朋. 转入WIF-1或5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化抑制骨肉瘤模型鼠的肿瘤生长[J].中国组织工程研究，2016，20(27): 3984-3991. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.27.005 ORCID: 0000-0002-4900-3187(段飞) 文章快速阅读： 转入WIF-1或5-氮杂-2’-脱氧胞苷对骨肉瘤治疗的意义 段飞，男，1989年生，山东省菏泽市人，汉族，青岛大学在读硕士，主要从事脊柱外科研究。 通讯作者：李书忠，硕士，主任医师，青岛大学附属医院脊柱外科，山东省青岛市 266100 中图分类号:R318 文献标识码:B 文章编号:2095-4344 (2016)27-03984-08 稿件接受：2016-04-18 裸鼠骨肉瘤模型 使用5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基处理 转入WIF-1 论证：WIF-1或5-氮杂- 2’-脱氧胞苷能够干预骨肉瘤的进展 用药组肿瘤生长较对照组明显减慢，病理分化程度较对照组增高，肿瘤组织可见不同程度的 WIF-1 mRNA和蛋白表达 分析比较瘤体质量、体积、相对增长率、病理分级、WIF-1 mRNA和蛋白的表达变化 文题释义： DNA甲基化：是一种重要的遗传修饰，广泛存在于肿瘤的发生过程。甲基化可导致抑癌基因的转录失活，参与肿瘤的发生发展，多种肿瘤临床病理学分析也发现其中存在高甲??化改变。 WIF-1：是一种抑癌基因，WIF-1基因甲基化后WIF-1蛋白表达下调，失去对Wnt蛋白的拮抗作用，致使Wnt信号通路异常激活，胞质内β-catenin避免了被磷酸化而降解，导致细胞凋亡受到抑制，诱导肿瘤的发生。WIF-1由于启动子过度甲基化后在组织中的表达下调，致使对照组瘤体较用药组增长迅速。 鼠骨肉瘤模型：基因组分析资料表明，小鼠的基因与人类相似达95%，说明小鼠模型在模拟人类疾病时具有得天独厚的优势。因此实验选用SPF级小鼠建立骨肉瘤模型，移植细胞株按其来源可分为鼠源性和人源性，人源性细胞株可以用来研究基因突变是如何导致肿瘤发生和转移的，从而为临床治疗提供帮助。人源性细胞株包括MG-63，POS-1、U2-OS、HOS-58及SAOS-2等，其中MG-63、POS-1等建立的动物模型肿瘤可以自行发生肺部转移，与人类肿瘤表现类似，也常用于研究抗癌药物的有效性，是较好的研究模型。因此实验选用MG-63作为移植细胞株进行造模。 摘要 背景：WIF-1是一种抑癌基因，由于启动子过度甲基化从而导致其在大多数肿瘤中的表达下调，而DNA甲基化抑制剂可使一些基因发生去甲基化从而恢复其表达。 目的：在骨肉瘤动物模型中转入WIF-1或使用5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化处理后，观察瘤体的病理学差异及WIF-1 mRNA和蛋白的表达变化。 方法：建立鼠骨肉瘤模型，分为3组，对照组：不做任何处理；5-氮杂-2’-脱氧胞苷组：每只每日注射适量5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化剂；WIF-1组：每只每日注射适量Wnt/β-catenin信号转导通路抑制剂WIF-1。用药后第7天开始每7 d称裸鼠体质量，测量肿瘤短径(a)和长径(b)，分别计算各组肿瘤的相对体积，计算用药后第7，14，21，28，56天的肿瘤相对增