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PAGE \* MERGEFORMAT 3 本科毕业论文（设计） 题目：黄粉虫热休克蛋白70基因片段的克隆与序列分析 学生：纪成兴 学号：201040830212 学院：生命科学学院 专业：生物科学 入学时间：2010年9月 16日 指导老师：崔亚东 职称：教授 完成日期：2014年5月1日 诚信承诺书 本人在此承诺，此次论文《黄粉虫热休克蛋白70基因片段的克隆与序列分析》是在崔亚东教授的指导下独立完成，没有抄袭行为。在此篇论文中出现的其他作者的观点和材料的处理都作出了注释。如若不是，一切后果由本人自行承担。 承诺人签名： 时间：2014年 5月1日 黄粉虫热休克蛋白70片段基因的克隆与序列分析 摘要：本实验是以黄粉虫(Tenebrio molitor)为实验材料，用Tris苯酚提取黄粉虫DNA。根据GenBank 中发表的昆虫热休克蛋白70( heat shock protein 70, HSP70) 基因的保守序列设计引物, 利用PCR 扩增的方法, 获得黄粉虫(Tenebrio molitor )的基因序列， 测序结果表明, 序列长为915bp，含有270aa。HSP氨基酸序列的系统进化分析表明：黄粉虫的热休克蛋白HSP70氨基酸序列与其他昆虫之间存在高度的同源性，更与小菜蛾(Plutella xylostella)的热休克蛋白HSP氨基酸序列的同源性高达97%。 关键词：黄粉虫、保守序列、热休克蛋白70、提取DNA、PCR、基因序列 Cloning and sequence analysis of?Tenebrio molitor?heat shock protein 70 gene fragment Abstract： This study is the yellow mealworm (Tenebrio molitor) as experimental material, DNA extracted with Tris phenol Tenebrio.According to published GenBank insect heat shock protein 70 (heat shock protein 70, HSP70) gene sequences conserved primers were designed to amplify by PCR method to obtain yellow mealworm (Tenebrio molitor) gene sequence, sequencing results showed that the sequence length 915bp, containing 270aa. System HSP amino acid sequence phylogenetic analysis showed that: between the heat shock protein HSP70 larva and other insects highly amino acid sequence homology, more homology with the diamondback moth (Plutella xylostella) HSP heat shock protein amino acid sequences of up to 97%. Key words： Tenebrio molitor conservatism sequence HSP70 DNA extraction PCR gene order 目录 一 综述…………………………………………………………………………………………………… 二 实验材料及其实验步骤………………………………………………………………………… 2.1实验材料………………………………………………………………………………………… 2.1.1实验材料…………………………………………………………………………………... 2.1.2实验试剂…………………………………………………………………………………... 2.1.3实验仪器……………………………