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;;;Introduction of Histology;;;;一、组织学研究内容： ; ; 2、组织(Tissue)： ;二、组织学研究方法： （一）一般光镜技术 ; 分辨率：能够区分物体相近两点的最小距离。 肉眼分辨率： 0.2 mm（毫米） 光镜（LM）： 0.2 μm（微米） 电镜（EM）： 0.2 nm（纳米） ; ; ; ; ;细胞核;2、冷冻切片方法 取新鲜组织立即投入到液氮中（-196℃）快速冻结，用恒冷箱切片机制成冷冻切片，可很好的保存细胞内的酶。 3、涂片法 取血液或分泌物直接涂于玻片上染色后观察。 ;（二）电子显微镜技术;1、透射电镜： 以电子束穿透样品，经聚合放大后显像于荧光屏上，进行观察和拍摄照片。 标本制作： 取材 固定 包埋 超薄切片 电子染色 透射成像 用途:观察细胞内部结构 ;;2、扫描电镜; ; （三）组织化学方法 是利用化学试剂与组织、细胞内的某些物质发生化学反应，在局部形成有色沉淀物。 用显微镜观察，并对组织、细胞内的化学成分进行定位、定性和定量的研究。 ;例如：过碘酸希夫氏反应 （Periodic acid Schiff reaction,PAS反应）： （显示细胞内糖原或多糖 ） HIO4 糖原 乙二醛基 + Schiff试剂 [O] → 紫红色沉淀物（糖原所在部位） ;;肝细胞内的糖原（PAS+）;（四）免疫组织化学方法 蛋白质（抗原） → 动物 → 特异性抗体 → 提取抗体 + 荧光染料（标记抗体 ）； 标记抗体 +相应组织蛋白质 → 标记抗体 —抗原特异性结合。（抗原分布部位）。;免疫组化（荧光素标记） 皮肤毛细血管内皮细胞; ;常用的标记物两有两种： 1、放射性核素（35S、 32P 、3H）经放射性自显影技术处理后观察。 2、非放射性药物（地高辛）经免疫组化处理后观察; （六）细胞培养 将人体或动物的活细胞、活组织在体外培养。 ; （七）组织工程 是用细胞培养技术在体外模拟构建组织和器官的技术。 ;三、组织学与胚胎学研究进展 （一）干细胞研究与前景 干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。 特点： 在一定条件下，能发育分化成各种功能的细胞 ；在细胞形态上、生长特征、细胞表面标记、细胞核型等方面都具有一些特性。 ; ;放射自显影 胃小凹底部的干细胞;;;;;免疫组织化学（荧光素标记）; 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）;免疫组织化学电镜像; （3）原位杂交术（in situ hybridization) 用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细胞内待检的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,即杂交,然后通过对标记物的显示和检测,而获知待测核酸的有无及相对量的方法。 碱基的标记物 放射性核素 放射自显影 （涂感光乳胶、暗处曝光 、显影、定影） 地高辛 免疫组织化学术 ;原位杂交;;图像分析仪; 计算机三维重建;;放射自显影像(3H-TdR掺入); 2.细胞培养术（cell culture） 把机体细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。不仅可用于研究其代谢、增殖、分化、形态和功能变化，还可研究各种理化因子对活细胞的直接影响。 组织培养术、器官培养术 in vitro 原代培养 传代培养 细胞系（cell line） 细胞株（cell strain） ;