各类成分分析 生物碱资料.pptVIP

* * * 第五章 各类成分分析 中药分析教研室 王术玲 Tel:生物碱* 皂苷* 黄酮* 蒽醌 挥发油 第五章 各类成分分析 一、概述 二、理化性质 *三、供试品溶液制备（提取、净化） *四、鉴别：理化鉴别、TLC *五、含量测定：总成分、单体成分 第五章 各类成分分析 春花秋月何时了， 往事知多少！ 小楼昨夜又东风， 故国不堪回首月明中。 雕栏玉砌应犹在， 只是朱颜改。 问君能有几多愁？ 恰似一江春水向东流！ 虞 美 人 —— 李煜 马钱子 腰直不起，头足相就，状如牵机而死——强直性惊厥 1988年奥运会 ，卡尔·刘易斯 ，麻黄碱 1992年奥运会，巫丹，士的宁 1992年奥运会 ，玛丽·乔·费尔南德斯 ，伪麻黄碱 1994年世界杯，马拉多纳，麻黄碱 2000年奥运会 ，拉杜坎，麻黄碱 生物碱与兴奋剂 生物碱与毒品 伪麻黄碱 麻黄碱 冰毒 一、概 述 黄连：小檗碱、巴马汀、药根碱、表小檗碱 苦参：苦参碱、氧化苦化碱 益母草、延胡索、黄柏、贝母 麻黄：麻黄碱、伪麻黄碱 马钱子：马钱子碱、士的宁 第一节 生物碱 麻黄碱 小檗碱 1、结构：C、H、O、N，碱性 二、理化性质 2、溶解性 亲脂性：大多数，氯仿中溶解度最大 亲水性：少，季铵型 二、理化性质 一般都易溶于酸水 3、沉淀反应： 1）碘化铋钾（BiI3·KI） 2）雷氏盐 NH4[Cr(NH3)2(SCN)4] 3）苦味酸 干扰：蛋白质、多肽、鞣质 沉淀特点：酸性水溶液（苦味酸在中性）中 沉淀常易溶于有机溶剂 沉淀有颜色 二、理化性质 4、光谱特征 小檗碱：225 、 270 、 331nm 366nm下 有荧光 麻黄碱：210nm 二、理化性质 1、有机溶剂提取法： 碱化+ CHCl3 士的宁的含量测定： P127 碱化+ CHCl3提取→酸水 提→碱化→CHCl3萃取 三、供试品溶液的制备 2、氧化铝柱色谱法： 益母草（药典P203） 水苏碱的薄层鉴别： 取本品3g → 乙醇回流提取 → 上活性炭-氧化铝柱 → 乙醇洗脱→收集 三、供试品溶液的制备 3、离子交换树脂法： 益母草流浸膏（药典P280） 水苏碱的含量测定： 取本品5g → 盐酸调pH1~2 → 加置强酸型阳离子树脂柱 → 水洗脱（弃去） → 氨水洗脱 → 收集 三、供试品溶液的制备 （一）理化鉴别 马钱子散：马钱子、地龙 取马钱子散→加浓氨试液→三氯甲烷浸泡→滤过→滤液蒸干→加稀盐酸→加碘化铋钾试液→黄棕色沉淀 四、定性鉴别 （二）薄层鉴别 1、展开系统：乙二胺、氨水 P122 正丁醇-盐酸-水（4:1:0.5）生物碱盐 四、定性鉴别 2、对薄层板改性：1~2%NaOH溶液 例：黄连中生物碱 苯-EtOAc-MeOH-异丙醇-水 （6:3:1.5:1.5:0.3） 置氨水饱和的展开槽 2）显色剂： 例：苦参：氧化苦参碱（药典P141） 3、检视： 1）365nm下看荧光 例：黄连：小檗碱 ①改良碘化铋钾 ②稀碘化铋钾+亚硝酸钠乙醇液 四、定性鉴别 （一）总生物碱 1、酸碱滴定法：返滴法 2、分光光度法 直接测定法：小檗碱 比色法：苦味酸、雷氏盐 P125 排除干扰：化学分离、柱色谱 五、含量测定 例：雷氏盐比色法 B + NH4[Cr(NH3)2(SCN)4] = BH[Cr(NH3)2(SCN)4] ↓ 1、在酸性介质中定量反应 2、反应物有颜色，其吸光度取决于硫氰酸铬铵部分 3、反应物不溶于水，易溶于丙酮 例：雷氏盐比色法 P71 益母草口服液中生物碱的含量测定 测定方法： 1、沉淀过滤，溶于丙酮，直接测定A 2、滤除沉淀后，测定残存的过量雷氏盐，间接计算 又如：产妇康颗粒 1、HPLC： ①离子抑制色谱：二乙胺、三乙胺 例：浙贝母 药典P205 ②离子对色谱：SDS、辛烷基磺酸钠 常加入缓冲盐 例： HPLC测小檗碱 （二）单体成分 五、含量测定 乙腈-水（50：50） 每100ml含0.34g KH2PO4和0.17g SDS 牛黄千金散中盐酸小檗碱 乙腈-水-二乙胺（70：30：0.03） 浙贝母中贝母甲素和贝母乙素 小儿清热止咳口服液中盐酸麻黄碱 乙腈-0.1%磷酸溶液（含0.1%三乙胺）（3:97） 流动相缓冲盐的pH值对