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乙型肝炎病毒基因型的临床意义 与生物学特性 复旦大学基础医学院 医学分子病毒学重点实验室 童舒平 乙型肝炎病毒：小病毒、大问题 ? 有包膜的病毒； ? 基因组仅3.2kb； ? 为双股环状DNA; ? 4个基因: 重叠、同方向； ? 核心与包膜基因表达多个蛋白。 包膜基因编码三种包膜蛋白 AU G AU G AU G UA A preS1 preS2 S 包膜基因 L (大) 蛋白 M (中) 蛋白 S (小) 蛋白 L 蛋白：介导病毒颗粒形成。 M 蛋白：增强病毒颗粒分泌效率。 S 蛋白：分泌病毒颗粒与亚病毒颗粒。 核心基因编码两个功能绝然不同的蛋白 AUG AUG 核心抗原 核心基因 HBeAg 酶切 precore/core 蛋白 precore core 核心抗原 HBeAg 翻译自 pg RNA pc RNA 装配成颗粒 是 否 对于DNA复制 必需 不需 引起 免疫清除 免疫耐受 furin signal peptidase A 基因型产生多种大小的HBeAg A B D 非A基因型 TTVVRRRGRSPRRRTPSPRRRRSQSPRRRRSQSRESQC TTVVRRRDRGRSPRRRTPSPRRRRSQSPRRRRSQSRESQC 14 6 18 3 14 6 18 5 furin 酶切位点 (RXXR) Ito et al., 2009, J. Virol. 83: 3507-3517. A基因型 基因型 10-5-2014 乙肝病毒的核心抗原表达量 与DNA复制水平紧密相关 ? HBV DNA复制只需要pg RNA; ? pg RNA既是核心抗原与DNA多聚酶的mRNA, 也 被装配进核心颗粒，转化成DNA； ? 因此，核心抗原表达量与复制水平相关； ? 在免疫清除期，复制水平越高，免疫清除反应 也越强列。 ? 这可以解释为何核心启动子突变与暴发性肝炎 及肝癌均密切相关。 10-5-2014 核心启动子突变的生物学效应 ? 3.5-kb的 pc RNA 编码 HBeAg, 而 3.5-kb的 pg RNA 用于基 因组复制； ? 这两种 mRNA的转录受核心启动子调控； ? 核心启动子突变通过降低pc RNA的转录减弱 HBeAg 表 达，通过增高pg RNA的转录促进 DNA复制； ? 1762/1764/1766三联突变可使 DNA 复制增强10倍以上! Parekh et al., 2003, J. Virol., 77: 6601-6612. 乙肝病毒遗传变异的两个方面： 基因型与突变株 不同病人 基因型 不 同 时 间 野 生 型 亚型 株 突 变 株 乙型肝炎病毒与宿主的免疫清除反应: 猫与老鼠之间的游戏 免疫耐受期 野生型病毒 HBeAg表达强 HBsAg表达强 DNA复制低 免疫清除期 (HBeAg+) 核心启动子突变 减弱HBeAg表达 增强DNA复制 免疫清除期 (HBeAg-) 前C区突变 防止HBeAg表达 免疫清除期 (HBsAg 低) 前S区缺失突变 S区免疫逃避突变 删除前S区抗原决定族 减少HBsAg分泌 减弱HBsAg识别 HBV 基因型的地域分布 ? A: 印度，欧洲，非洲，北美洲 ? B: 中国，日本，东南亚 ? C: 中国，韩国，日本，东南亚 ? D: 印度，欧洲，非洲，北美洲 ? E: 非洲 ? F: 南美洲 ? G: 同性恋男子 ? H: 南美洲 地域分布高度重叠的基因型 ?A、D：印度，欧洲，非洲，北美洲 ?B、C: 中国，日本，东南亚 ?F、H:南美洲 A与D基因型临床表现之差异 传播方式 A: 性接触 D: 输血与移植 急性感染慢性化机率 A高于D 暴发性肝炎发生率 D高于A 慢性感染HBeAg阳性期 A长于D 前C区G1896A突变率 D大大高于A 核心启动子突变率 A高于D 干扰素疗效 D优于A A与D基因型生物学特征之差异 ? D基因型的复制能力往往高于A基因型； ? D基因型的S蛋白表达与HBsAg释放明显低于 A基因型； ? A基因型分泌不同大小的HBeAg分子； ? D基因型可通过G1896A突变阻断HBeAg表达， 而A基因型不能。 pg RNA 包装信号 A – U U : G C – G C – G 多 数 基 因 型 A – U C – G C – G C – G A基 因 型 A – U U – A