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实验七血清丙氨酸氨基转移酶
实验七 血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定???????????????——改良赖氏法
一、实验目的二、实验原理三、仪器和试剂四、实验步骤 加入物（ml） 测定管 测定空白管 血清 0.10 — 加温至37℃的丙氨酸氨基转移酶基质液 0.50 0.50 各管分别混和，置37℃水浴30分钟，取出。 2，4—二硝基苯肼溶液 0.50 0.50 血清 — 0.10 各管分别混匀，置37℃水浴20分钟，取出。 0.4 mol/L NaOH溶液 5.00 5.00 在30分钟内用波长505nm比色，以蒸馏水校正零点和100%，读取各管吸光度。测定管吸光度减去测定空白管吸光度后，于标准曲线上查得酶活性单位。 ?????标准曲线绘制：（所加试剂按毫升计） 加入物 （ml） 管 号 1 2 3 4 5 丙酮酸标准液（2mmol/L） 0 0.05 0.10 0.15 0.20 丙氨酸氨基转移酶基质液 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.0667 mol/L磷酸盐缓冲液 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 相当于丙酮酸实际含量（?mol/L） 0 0.1 0.20 0.30 0.40 相当于丙氨酸氨基转移酶活力（卡门氏单位） 0 28 57 97 150
各管混匀后置37℃水浴5分钟，加2，4—二硝基苯肼溶液0.5毫升混匀，置37℃水浴20分钟，取出，每管各加0.4 mol/L NaOH溶液5.0毫升，于30分钟内用波长505nm比色，以蒸馏水校正零点和100%，读取各管吸光度。以各管读数减去空白（第一管）读数后，以各管吸光度为纵坐标，以各管对应的单位数为横坐标作图，绘成标准曲线，两者应呈直线关系。 不做标准曲线时，可做28卡门氏单位标准管，按下式计算结果： = 卡门氏单位
五、参考值六、注意事项
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