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微生物学芽孢

兽医微生物学 华农兽医学院新楼 213 TelE-mail:ywluo@scau.edu.cn 芽孢是不是细菌的一种繁殖方式? 芽孢是不是细菌的一种特殊结构? 芽孢是否得在不良环境下形成? 芽孢 (Endospore) 在某些细菌内形成(芽孢杆菌属、梭菌属等) 处于休眠状态 对许多环境条件具有抗性 抗热 抗辐射 抗化学物质 抗干燥 是什么使芽孢具有如此强的抗逆性? 渗透调节皮层膨胀学说 芽孢外被 钙 (与吡啶二羧酸结合) 含水量很低的芽孢核心 其它机制 酸溶性DNA结合蛋白(芽孢小蛋白) DNA 修复酶 芽孢形成(Sporogenesis) 通常在营养耗尽而停止生长时发生 (炭疽杆菌与破伤分杆菌/苏云金杆菌) 发病动物处理 多阶段反应过程 芽孢萌发 芽孢向营养态细菌的转变 复杂的多级反应过程 芽孢萌发过程 活化(activation) 预备 通常需要热处理 出芽 (germination) 孢子膨大 芽孢外被吸水破裂 抗逆性缺失 代谢活动增强 生长(outgrowth) 出现营养状态细菌 研究意义: 细菌分类、鉴定 灭菌衡量指标 (肉罐头的肉毒梭菌、外科器材的破伤风梭菌) 生物武器 伴胞晶体的杀虫功能 第4节细菌形态和结构观察 1.普通光学显微镜 最小可分辨距离= 4.1 细菌的染色 第2章 细菌的生长繁殖和生态 一 物质摄取 单纯扩散 促进扩散 主动运输 基团转位 二、生物合成 合成:氨基酸、核苷酸、糖、脂肪酸等 1. 作为鉴别细菌的主要措施(不同营养需求、不同合成途径) 2. 细菌生物合成环节可被药物影响 (磺胺类药物干扰细菌叶酸的合成) 三、聚合作用 DNA复制 半保留复制 转 录 翻译 四、组装 自我组装(self-assembly): 自我组装可在体外试管内完成,鞭毛及核糖体即采用此种方式。 指导组装(guided assembly): 细菌表面膜结构则只能依赖指导组装来完成。 第2节 细菌的生长繁殖 液体培养细菌的生长曲线 新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡 ,营养的消 耗、代谢产物的蓄积等。 第三节 细菌的人工培养 培养基(culture medium) (一)按营养组成的差异 1.基础培养基 : 基本营养成分 2.营养培养基 : 在基础培养基中添加一些其它营养物质,如葡萄 糖、血液、血清、生长因子等 1.固体培养基 : 1.5%~2%琼脂,用于细菌分离纯化。 2.半固体培养基: 0.5%琼脂,作穿刺试验。 3.液体培养 : 扩增纯培养的菌体。 1.鉴别培养基:在培养基中加入特定底物,观察细菌在其生长后分解 底物如何,从而鉴别细菌。 2.选择培养基:在培养基中加入某种化学物质,使之抑制一类细菌 生长,而有利于另一类细菌生长,从而将后者选择出来。 3.厌氧培养基:专供厌氧菌的分离、培养和鉴别用. 将普通培养基放在 无氧环境中培养,或者使培养基本身成为无氧的环境。 细菌在固体培养基中的生长情况 光滑型菌落 粗糙型菌落 粘液型菌落 细菌在半固体培养基中的生长情况 1:有动力 2:无动力 细菌在液体培养基中的生长情况 菌膜 菌沉淀 均匀浑浊 对照 (三)按功能的差异 * 罗永文 芽孢 (Endospore) endospore sporangium central spore subterminal spore terminal spore terminal spore with swollen sporangium Figure 3.42 2. 芽孢衣 Spore coat 3. 皮层 Cortex 1. 孢外壁 Exosporium 核心壁 Core wall DNA 核糖体 Ribosomes (苏云金芽孢杆菌) 0.61λ n sinθ n:玻片与物镜间介质的折射率(空气:1,水:1.33,香柏油:1.52) Λ:所用光源波长 θ : 物镜镜口角的半数 蓝光(450 nm),油镜达最大分辨率:0.18μm 2. 暗视野显微镜 3. 相差显微镜 样品的折射率和厚度不同,产生相位差 配备:环状光阑和相差板 能在不然色的情况下观察样品 4. 荧光显微镜 6.

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