DRAFT-FCQ使用指南20130329.docxVIP

FluorChem Q使用手册拍摄部分开机1、检查室温及湿度， 仪器要求室温低于25℃， 湿度低于70%。先开电脑，再开主机电源和相机电源，等设备自检结束后最后打开AlphaView拍摄软件。注意：如果只打开成像系统而未打开AlphaView软件， CCD温度将只降至-10℃。3、开机后等待20分钟，CCD温度降至-25℃并稳定运行。如果未到-25℃，点击键会出现警告信息。拍摄WESTERN BLOT， CCD温度必须降至-25℃！AlphaView 软件有四个主控制区Acquire 用于拍摄图像Contrast Adjustments 用于图像调节Enhancement Tools 用于图像效果增强Analysis Tools 用于图像分析拍摄1、对焦1)在AlphaView软件主界面上点击键进入相机设置和预览窗口；2)点击键打开实时图像预览窗口；3)对焦和光圈调节：对焦旋钮，调节旋钮，聚焦图像光圈旋钮，调节光圈，控制进光量。光圈值越小，光圈越大。图中光圈值为0.95，即光圈全开，这时进光量最大。a.在拍摄化学发光信号时，将化学发光低背景板置于暗箱中的中间档位，光圈打至最大处（0.95），关闭所有暗箱内光源，半开暗箱的门，调节对焦旋钮，聚焦图像，直到AlphaView软件的Live（实时图像预览窗口）中的化学发光背景板上的数字变清晰为止，这样就完成对焦了。b.在拍摄EB胶时，取走化学发光低背景板或荧光背景板，将EB胶放在紫外透射箱上中央位置，紫外透射箱上开关打在302nm档上，关闭暗箱门，调小光圈（0.95的数值）至光线减弱，以致能看清EB胶的位置，调节对焦旋钮，聚焦图像，直到AlphaView软件的Live（实时图像预览窗口）中显示清晰的核酸条带图。c.在拍摄考马斯亮蓝染色的或银染的蛋白胶时，同样取走化学发光低背景板或荧光背景板，将暗箱内背部折叠的透射白光板拉下放平，蛋白胶放置于白光板中央，关上暗箱门，从暗箱面板上打来透射白光光源，调小光圈（0.95的数值）至光线减弱，以致能看清蛋白胶的位置，调节对焦旋钮，聚焦图像，直到AlphaView软件的Live（实时图像预览窗口）中显示清晰的核酸条带图。2.拍摄对于FCQ, 可在AlphaView主界面上PROTOCOL中的Load Protocol下拉条中直接选择所需拍摄的模式，如化学发光，EB胶，多色荧光，软件会自动配置所需光源和滤光片的组合，可直接进行一步操作。该界面用于相机曝光控制，灵敏度/解析度控制，光源/滤光片选择，对比度显示选择和暗箱门的开合状态。自动映像通道以选项卡结构显示， 一个选项卡代表一个通路并包含了该通路中完整的配置信息。：点击蓝色LIVE键，可从预览窗口看到实时图像。可方便的用来放置样品，对焦和光圈设定。: 点击绿色预览键可预览最终图像的同时对不满意的部分作出及时调整。: 点击获取最终图像，进而存储，打印和分析。: 选择MOVIE MODE, 用户可以获取一系列不同曝光时间，不同解析度和不同降噪设置的图像。1）自动曝光模式拍摄：勾选AUTO EXPOSE，点击，其下方会产生红色的进度条，当进度条变绿色时，说明仪器已经找到最适曝光时间，这时点击完成拍摄，得到相应曝光时间的照片。勾选AUTO EXPOSE手动曝光设置：单箭头是增加或减少10%，双箭头是翻倍或减少一半曝光时间点击AUTO EXPOSURE SETUP键进入曝光补偿界面这里有四个选项：正常曝光化学发光用于弱条带检测的过爆客户设置曝光补偿输入曝光时间单位：分：秒：毫秒2）手动曝光模式拍摄一旦样品放好并对焦准确后，关上暗箱门，确认打开合适的光源。另外再次确认暗箱控制软件界面显示暗箱门关闭正常。取消AUTO EXPOSE选项。以输入或选择毫秒，秒，分钟和小时为单位的曝光时间，点击ACQURIE。下面列出不同应用中理想曝光时间设置：? 对于大多数白光应用，50ms曝光已经非常充足。最终的光圈调节和滤光片运用可以进一步优化提高图像质量。?对于紫外光源的应用，曝光范围为8ms-4s。如有其它调整光圈需全打开，在该运用中推荐使用显示饱和度选项。?在诸如化学发光等低亮度图像拍摄中，曝光时间可能会较长。这时， 可以输入想要的曝光时间直接点击ACQUIRE键获取图像。 如果最佳曝光时间未知，可以先选择SUPER SPEED （即SUPER SENSITIVITY）和AUTO EXPOSE, 根据信号强弱会得到自动曝光的图像，给出曝光时间，通常情况曝光时间会小于3分钟。然后可以取消AUTO EXPOSE,选择不同灵敏度（BINING 模式）获取一张更高解析度的图像。注意：当系统切换到预览模式时，图像会闪烁或变白， 这是因为图像光信号的收集捕捉到信号转换和信号输出会有一个过程。 光源和滤光片控制暗箱门上的触控面板和软件控