溶液配制方法p.docVIP

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0) 组份浓度：1 M Tris-HCl，配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25℃下）加一定量的浓盐酸（11.6N） 浓盐酸的体积（ml） pH 8.6142128.53846566671.376 9.08.88.68.48.28.07.87.67.47.2 4. 将溶液定容至1 L。5. 高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。 Tris–HCl冲液（0.05M，25℃） 50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。 pH X(毫升) pH X(毫升) 7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60 7.70 7.80 7.90 8.00 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.029.2 8.10 8.20 8.30 8.40 8.50 8.60 8.70 8.80 8.90 26.2 22.919.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 7.0 三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2-CH2OH-CHOCH2-NH2分子量=121.14;0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 0.5 M EDTA(pH8.0)组份浓度：0.5 M EDTA，配制量：1 L，配制方法：1. 称取186.1 g Na2EDTA·2H2O，置于1 L烧杯中，加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。2. 用NaOH调节pH值至8.0（约20 g NaOH)。注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。3. 加去离子水将溶液定容至1 L，适量分成小份后，高温高压灭菌，室温保存。 10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA，配制量：1 L3 M 醋酸钠(pH5.2) 组份浓度：3M 醋酸钠，配制量：100ml配制方法： 1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。 PBS Buffer (1×)组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10mM Na2HPO4, 2mM KH2PO4，配制：1 L配制方法：称量试剂:8g NaCl, 0.2g KCl, 1.44g Na2HPO4, 0.24g KH2PO4，置于1 L烧杯中。加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。高温高压灭菌后，室温保存。 PB缓冲液(pH8.0)：1L NaH2PO4 0.16537g, Na2HPO4 6.7817g.注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 10 M 醋酸铵组份浓度：10 M 醋酸铵，配制量：100 ml配制方法： ?1. 称量77.1 g醋酸铵置于100～200 ml烧杯中，加入约30 ml的去离子水搅拌溶解。?2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。?3. 使用0.22 mm滤膜过滤除菌。?4. 密封瓶口于室温保存。?注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。 常用缓冲液的配制方法 1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M） X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸 再加水稀释至200ml. pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml 2.2 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0 甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L. 2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M） X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M盐酸 再加水稀释至20