高一生物细胞的化学成分总汇.ppt

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* * (7)核酸酶(催化核酸) 核酸酶是唯一的非蛋白酶(在原生动物四膜虫体内发现)。它是一类特殊的RNA,能够催化RNA分子中的磷酸酯键的水解及其逆反应。 酶活力又称为酶活性,一般把酶催化一定化学反应的能力称为酶活力,通常以在一定条件下酶所催化的化学反应速度来表示。 酶活力测定就是测定一定量的酶,在单位时间内产物的生成量或底物的消耗量。即测定时确定三种量:①加入一定量的酶;②一定时间间隔;③物质的增减量。 酶的比活力:是每单位蛋白质中的酶活力单位数(如:酶单位/mg蛋白),对同一种酶来讲,比活力愈高则表示酶的纯度越高(含杂质越少),所以比活力是评价酶纯度高低的一个指标。 1、核酸的化学组成 核 酸 (RNA、 DNA) 核苷酸 核苷 磷酸 戊糖 碱基 核糖(RNA) 脱氧核糖(DNA) A、G、C、U A、G、C、T 五、核酸 胸腺嘧啶 尿嘧啶 腺嘌呤 鸟嘌呤 胞嘧啶 核苷 戊糖第1’位的碳与嘧啶碱第1位的N以糖苷键相连结 戊糖第1’位的碳与嘌呤碱第9位的N以糖苷键相连结 C1-N1连接; C1-N9连接;C1-C5连接 (假尿苷) 次黄嘌呤苷(肌肉中含量最多 ) 尿苷 核苷酸 戊糖第5’位的碳再与磷酸以酯键相连 2、核苷酸的连接方式 核苷酸之间以磷酸二酯键连接形成多核苷酸链,是DNA和RNA的一级结构。 DNA的一级结构 RNA的一级结构 ACTG A P 脱氧 核糖 G P 脱氧 核糖 C P 脱氧 核糖 T P 脱氧 核糖 脱氧 核糖 A P G P C P T P 脱氧核糖 脱氧核糖 脱氧核糖 A T G C 碱基互补 配对原则 3、DNA的二级结构 两条平行的脱氧核苷酸长链向右盘卷成双螺旋结构. 大沟、小沟有利于蛋白酶、金属离子以及具有生物功能的金属配合物与DNA的作用。 DNA双螺旋结构稳定的因素 (1)氢键: A=T;G≡ C (2)碱基堆积力 (3)离子键 4、DNA的三级结构 定义:双螺旋进一步扭曲形成的更高层次的空间结构。如超螺旋等。 RNA的结构 A 核糖 P C 核糖 P U 核糖 P P G 核糖 A A G G C U U 5、核酸的紫外吸收 DNA分子的变性 6、核酸的变性,复性及杂交 变性和复性的含义 性质改变: ①溶液粘度降低 ②溶液旋光度发生改变 ③ 增色效应:与天然DNA相比,变性DNA因其双螺旋结构破坏,使碱基充分外露,因此,紫外吸收增加,这种现象叫~。 DNA的变性:高温、酸、碱或某些变性剂能破坏核酸中的氢键,使有规律的螺旋型双链结构变成单链。 DNA的熔解温度 增色效应达到一半时的温度或DNA双螺旋结构失去一半时的温度称为“熔点”或解链温度,用Tm 表示。 DNA的热变性是爆发式的,在很狭窄的温度范围内,70℃ ~ 85 ℃ 影响Tm的因素 1.DNA 的均一性越高,Tm的温度范围越小。 2.G-C含量越高, Tm的值越大 3.介质的离子强度较高时, Tm的值较大。 复 性 DNA的复性:变性的DNA在适当的条件下又可使两条彼此分开的链重新缔合成双螺旋。 DNA复性的影响因素: ①温度和时间(缓慢冷却到室温) ②DNA的浓度越高,复性的速度越快; ③DNA的重复序列越多,复性的速度越快; ④溶液的pH过高或过低,复性的速度均会降低; ⑤DNA的片段越大,复性的速度越慢; 核酸的杂交及其应用 在DNA变性后的复性过程中,如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂合双链。 这种杂合双链可以在不同的DNA与DNA之间形成,也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 (三) DNA的分子杂交技术 通常将其中的一方用放射性同位素标记,称作探针,现在的探针多为人工合成的短片段。 将人工合成的探针用点样机点到玻璃或塑料基片上形成高密度的阵列,将样品DNA用限制性内切酶切割成一定大小的片段,变性后用荧光分子标记,再进行分子杂交操作,这就是DNA芯片技术的基本原理。生物芯片技术有非常广阔的应用前景。 * * * * * * * * 稳定蛋白质三维结构的作用力 盐键 氢键 疏水键 范德华力 二硫键 三级结构:蛋白质的三级结构主要指氨基酸残基的侧链间的结合借助疏水键、氢键、盐键、范德华力、二硫键等形成的。多肽链经过如此盘曲后,可形成某些发挥生物学功能的特定区域,例如酶的

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