多种药材与制剂中大黄酚与大黄素含量测定改进方法.docVIP

多种药材与制剂中大黄酚与大黄素含量测定改进方法 　　[摘 要]目的：改进大黄酚与大黄素的测定方法。方法：通过甲醇提取与酸水解同步进行，用高效液相色谱法简便、快捷、准确地测定了多种药材与制剂中大黄酚与大黄素含量。色谱条件为：sihmadzuvP一ODS C18l：（150mmx4.6mm，5μm）为色谱柱，甲醇一0.1%磷酸（85：15）为流动相，流速：1.0mL?min-1，检测波长为254nm。结果：通过方法学考察，大黄酚的进样量在0.022一0.32μg（r=0.9999），大黄素的进样量在0.015一0.22μg（r=0.9999）范围内，呈良好的线性关系。大黄酚与大黄素的平均回收率（n=3）分别为96.10%一101.7%和96.75%一100.9%。结论：改进方法检测效率高，检测成本低，环境污染轻。 　　[关键词]药材；制剂；大黄酚；大黄素；改建方法 　　中图分类号：U879 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）10-0356-01 　　传统大黄酚与大黄素含量测定所选用的方法比较烦琐，也浪费时间，同时还存在着比较大的误差，因此需要对这两种物质含量测量进行改进，可以将甲醇、酸水等有机融合起来，不再进行氯仿萃取、蒸干的环节，此种方法不仅简单，花费的时间也比较少，同时还不会受到温度等因素的干扰。大量的实践证明，应用改进后的方法来对上述两种物质进行含量测量，效果比较好，同时还能够减少环境污染，为操作人员的生命健康也提供了一定的保证。 　　一、材料、仪器与试药 　　痛风舒片（批号：050401，0.49?片-1）、碧云砂乙肝胶囊（批号：050711，0.59?粒-1）由承德燕峰药业股份有限公司提供；三黄片（批号：0505201，0.259?片-1）为河北省药品检验所留样。药用大黄（批号：120984一200301）、虎杖（批号：120980-200002）、决明子（批号：121011一20以03）药材、大黄酚对照品（批号：96一200107）、大黄素对照药品（批号：0756-200211）购自中国药品生物制品检定所。日本岛津LC一IOADvp泵；SPD一Ml0ADvp二极管阵列检测器；CLASS一VP/LC色谱工作站；美国77251手动进样器。美国Waters2695分离单元；Waters2487双波长紫外检测器；Empower色一潜工作站。流动相所用的试剂为色谱纯，其他试剂、试药均为分析纯。 　　二、实验过程 　　1、溶液制备 　　1.1 制备对照品溶液 　　研究者要分别精确的称取大黄酚与大黄素，充当对照品，再分别的添加一定量的甲醇，制成为1ml中含有0.4mg的溶液，而后称取溶液添加90%甲醇，而后分别制成8μg/ml的大黄酚溶液、4μg/ml的大黄素溶液。 　　1.2 制备供试品溶液 　　研究者选择专门工具进行准备称取，放入到塞三角瓶中，而后再添加甲醇与盐酸，两者之间的比例为10：1，溶液整体整体为25ml，精确称取重量，将溶液放入到80℃的水浴中，待到半个小时后，再放冷，如果瓶壁中存在黏附现象，采用超声去除，再使用甲醇补足，以此保证最终重量不会受到影响，而后摇晃均匀，过滤，再吸收2ml滤液，将其放入到10ml量瓶中，再添加氢氧化钠大约2%，体积为1ml，再添加甲醇直到制定刻度，而后摇晃均匀，过滤，再取滤液就获得了供试品溶液。 　　2、线性范围 　　研究者选择精密仪器分别称取对照品，之后再分别添加90%甲醇，制成10.8μg/ml的大黄酚与7.53μg/ml的混合溶液。将封面积看作是纵坐标，而将进样量看作是横坐标，以此绘制成为一个标准曲线。实践发现，大黄酚进样量保持在0.022-0.32μg之间，并且与峰面积保持着比较好的线性关系，大黄素的进样量在0.015一0.22μg，与峰面积呈良好的线性关系。 　　3、稳定性试验 　　取各供试品溶液及“精密度试验”项下的对照品溶液，分别于0，2，6，12，24h进样测定，考察了24h内的稳定性。结果各供试品溶液中大黄酚峰面积的RSD为0.41%一0.57%，大黄素峰面积的RSD为0.24%一0.99%；对照品溶液中大黄酚峰面积的RSD为0.26%，大黄素峰面积的RSD为0.40%。说明供试品溶液与对照品溶液在24h内稳定。 　　4、重复性试验 　　各样品取样量的80%，100%，120%，同一批样品取9份，按上述方法制备溶液，按“2”项下色谱条件测定。各样品9次测定的结果，见表1。说明方法重复性良好。 　　5、加样回收率实验 　　按上述方法各样品取样量的1/2，称取已知含量的同一批样品9份，平均分为3组，每组按此取样量的样品中大黄酚及大黄素含有量的60%，100%，140%添加对照品，照上述方法制备溶液测定，计算回