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第七节 几种常见的消毒灭菌法 实际应用 物体表面、空气消毒：采用30mg/m3质量浓度的臭氧作用15分钟，对自然菌杀灭率可达90%以上。要求空气中细菌总数≤500CFU/m3,可采用臭氧消毒，要求臭氧质量浓度20mg/m3在相对湿度70%，消毒时间≥30分钟。 饮用水消毒：臭氧用于消毒饮用水，作用速度快，效果可靠，能脱色除臭，降低水的浑浊度。 第七节 几种常见的消毒灭菌法 使用注意点 臭氧具有毒性，吸入臭氧后，可引起呼吸加速、变浅，胸闷等症状，进而脉搏加速，头痛。严重时可发生肺气肿，甚至死亡。为此，作业场所臭氧质量浓度不能超过国家允许标准（0.2mg/m3）。用臭氧进行空气消毒必须在密闭空间，人不在现场的条件下进行。消毒后至少过30分钟人才能进入。 臭氧为强氧化剂，对多种物品有损坏作用。如臭氧可使橡胶制品变脆、变硬，加速老化。 臭氧杀灭微生物的程度与臭氧浓度有关，与时间关系不大。 第七节 几种常见的消毒灭菌法 三、表面消毒法 醇类：目前使用最为普遍的是乙醇，它属中效消毒剂，可杀死各种微生物，但不能杀灭细菌芽孢、乙肝病毒。杀菌机制是使菌体蛋白质变性。使用浓度70%~75%。常用于皮肤及手的消毒。 表面活性剂：带阳电荷的季铵盐类化合物能被牢固地吸附于带有负电荷的细菌表面，破坏细菌质膜，使菌体成分漏出。这类化合物对细菌繁殖体有广谱杀灭作用，作用快而强，毒性亦较小，属于低效消毒剂。如新洁尔灭，常用于手、皮肤及操作台面等消毒。使用浓度0.2%。 谢 谢 * * * 第四节 细菌的人工培养 (二)培养基 按其用途可分为下列4大类。 1、基础培养基：含细菌所需要的基本营养成分，可供多数细菌使用。主要有牛肉膏(0.3％)、蛋白胨(1％)、氯化钠 (0.5％)、磷酸盐和水等配制而成，pH 7.2～7.6，此为液体培养基。若加入凝固剂，如2～3％琼脂，使其固态化，即为固体培养基，细菌经接种后可形成肉眼可见的菌落。如营养琼脂培养基。 若加0.1～0.5％琼脂，则为半固体培养基。常用于观察细菌动力或保存菌种；如普通肉汤半固体培养基。 第四节 细菌的人工培养 2、 营养培养基：在基础培养基中加入特殊营养物质，如血液、腹水、葡萄糖等，以供某些细菌的特殊营养要求。如血平板等。 3、选择培养基：利用细菌对某类化学物质敏感性不同，选择性抑制某些细菌，而有利于欲选细菌的生长，从而达到分离的目的。如水质检查中的品红亚硫酸钠培养基，伊红美蓝培养基等。 4、鉴别培养基：各细菌具不同的生化反应特性，可利用鉴别培养基加以区别，如糖发酵试验用的含糖含指示剂培养基，硫化氢生成试验用的醋酸铅培养基等。 第四节 细菌的人工培养 按培养基状态可分为下列3类。 1、固体培养基(solid medium) 在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态即为固体培养基。固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏等。 2、半固体培养基(semisolid medium) 半固体培养基中凝固剂的含量比固体培养基少，培养基中琼脂含量一般为0.2%～0.7%。半固体培养基常用来观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定等。 3、液体培养基(liquid medium) 液体培养基中未加任何凝固剂。在用液体培养基培养微生物时，通过振荡或搅拌可以增加培养基的通气量，同时使营养物质分布均匀。液体培养基常用于大规模工业生产以及在实验室进行微生物的基础理论和应用方面的研究。 第四节 细菌的人工培养 (三)细菌在培养基中的生长情况 将细菌接种到液体培养基中，大多数的细菌生长呈现均匀浑浊的状态，少数呈链状的细菌可呈沉淀生长，专性需氧菌多生长在液体表面，形成菌膜。 在半固体培养基上，无动力(无鞭毛)的细菌可沿穿刺线生长，呈明显的线形，周围培养基仍透明澄清。有鞭毛的细菌可向穿刺线四周运动弥散，呈羽状或云雾状浑浊生长，穿刺线模糊不清。故半固体培养基可用于检查细菌有无动力。 第四节 细菌的人工培养 单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落，我们称之为菌落。一般情况下，1个菌落由1个单独细菌经不断分裂繁殖堆积而成，故1个菌落属1个细菌的后代，是纯种。 由于细菌种类、菌龄以及培养基的成分等因素的不同，菌落的形态、大小、色泽也不一样。因此，菌落的形态特征是识别各种细菌的主要依据之一。另外，根据培养基上菌落的数目，也可计算样品(水、物体表面、空气等)中的活细菌数（cfu/mL）。 菌落形成单位（CFU，Colony-Forming Units）指单位体积中的细菌群落种数。 第四节 细菌的人工培养 第四节 细菌的人工培养 第四节