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让凝胶电泳变得更快、更漂亮 中国农业大学 赵春青 背景：电泳的原理就是通过电流对 DNA/RNA 片段产生的推动力的大小不同从而将不同片段大小的 DNA/RNA 进行分离，凝胶电泳的时候一般都是恒压电泳，要么速度慢，影响实验效率；要么条带跑出 来的很难看，分的不清楚，分不开。 方法改进：将电泳电压进行定时变化，例如可以在开始时将电泳电压调节至 100V，大约 15min， 使条带的确可以因为自身片段大小不同而产生较大差别的泳动速度，从而将片段分离，然而现在的分离 或许会间距较小，从而图片很不漂亮，或者不易观察。可以紧接着进行 120V-130V 的电压进行较小差 异电泳，但是由于电泳电压较大，可以避免过大的片段残存在胶孔不易泳动的情况。 结果：这样两个电压进行配合电泳，便可以得到非常漂亮的电泳条带，并且可以节省 1/5-2/5 左右 的时间。 2010年10月27日实验室创新技术精选（上） 第 2 页，共 20 页 下一页 返回 RNA 电泳如何得出漂亮的条带 福建医科大学 张小林 背景：RNA 电泳是分子生物实验中一个常用的实验方法，但 RNase 无处不在，所以常见的 RNA 电泳条带比较弥散，甚至检测不到，下面 RNA 电泳中的一些改进方法有助于你得到清晰可见的 RNA 条 带。 方法改进：1.电泳槽、制胶器、梳子等的清洗：去污剂浸泡过夜—— 自来水冲洗干净——ddH20 冲洗——3%H2O2 灌满浸泡过夜——灭活的0.1%DEPC 水冲洗干净——超净台内紫外线照射过夜。 2.烧瓶、烧杯、药匙、量筒等制胶器械的清洗：0.1%DEPC 水浸泡过夜后高压消毒灭活，烘箱烘干。或 者 ddH20 清洗干净，超净台内紫外线照射过夜。 3. 电泳缓冲液必须是 RNase free(最好买试剂公司的）。 4.预电泳 5-10min 减少了非特异 RNA 条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电 泳仪装置是否有误。 5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样 时 RNA 的扩散、加样后 RNA 从齿槽逸出造成 RNA 的弥散及定位不良等现象。 6. 电泳3-5min 让 RNA 进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的 RNA 量及定位的准确性,从而有利于 DNA 的鉴定和纯化。 结果： 第 3 页，共 20 页 下一页 返回 如何提高 SDS的分辨率 山东理工大学 康寿凯 背景：SDS是一种经常用到的实验手段，提高凝胶分辨率，更好地呈现实验结果，是我们 追求的目标。 方法改进：借鉴 Tricine-SDS中添加甘油或者尿素来提高分辨率的成功经验，在普通的 SDS中加入约 13%的甘油，同样可以提高分辨率，有效防止小分子量蛋白的弥散。只要把原来 配方中的水换成 60%的甘油，就可以了。 结果：加入甘油之后，条带较细，分得更开。 2010年10月27日实验室创新技术精选（上） 第 4 页，共 20 页 下一页 返回 SDS的两点改进 江苏大学 403 实验室 江苏大学的 403 实验室提出“ 改进一点点，我们能得到更加美观的 SDS胶” 。他们就 SDS凝胶电泳提出两点改进： 改进一：配胶 背景：在配制 SDS胶的时候，加入分离胶的过程中常常会带入气泡，即使用双蒸水来压平 界面也有可能因为力度不匀而导致胶面不够齐平，最后使跑出来的相同大小的蛋白条带不在同一个水平 面上。 方法改进：所做的改进很简单却很有效，加完分离胶后，用移液枪吸取酒精（浓度没有特别要求， 干净无污染就好）加到分离胶上至覆盖界面，静置片刻后放到 37℃恒温箱中可加速胶的凝固。待到分 离胶完全凝固之后倒去上层的酒精，就可以看到齐平漂亮的界面啦！ 改进二：脱色 背景：给染色结束的 SDS胶脱色往往需要比较长的时间，否则会由于脱色不完全而导致条 带不清晰，影响到拍照的效果。 方法改进：改进的