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TLC主要类型和原理
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一、薄层色谱的定义
薄层色谱(Thin Layer Chromatography),常用TLC表示,又称薄层层析,系将适宜的固定相(吸附剂或载体)涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,点样,在装有流动相的密闭容器中展开后,斑点显色,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用以进行物质鉴别、杂质检查或含量测定的定性定量分析方法。
属于固-液吸附色谱
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二、薄层色谱法的特点
①分离能力强,斑点集中,结果直观。
②灵敏度高,几微克,甚至几十纳克的物质也能检出。
③展开时间短,一般只需十至几十分钟。一次可以同时展开多个试样。
④试样预处理简单,对被分离物质性质没有限制。
⑤上样量比较大,可点成点,也可点成条状。
⑥仪器简单,操作方便。
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三、薄层色谱法主要类型和原理
常用固定相:硅胶类、硅藻土类、氧化铝类、微晶纤维素类等。
按分离效能分类:
经典薄层色谱法
高效薄层色谱法
按固定相性质及其分离机制分类:
吸附薄层色谱法
分配薄层色谱法
分子排阻薄层色谱法
离子交换薄层色谱法
胶束薄层色谱法
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固定相为吸附剂(常用硅胶、氧化铝、聚酰胺)的薄层色谱法称为吸附薄层色谱法。利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别,即吸附系数的差别而实现分离。
基本原理
在吸附薄层色谱中,将A、B两组分的混合溶液点在薄层板的一端,在密闭容器中用适当的溶剂(展开剂)展开。此时A、B两组分首先被吸附剂所吸附,然后又被展开剂所溶解而被解吸附,并且随着展开剂向前移动。由于吸附剂对A、B两组分具有不同的吸附能力,展开剂也对两组分有不同的溶解能力,因此当展开剂不断展开, A、B两组分在吸附剂和展开剂之间发生连
(一)吸附薄层色谱
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续不断的吸附、解吸、再吸附、再解吸过程,从而产生差速迁移而得到分离。
例如,当固定相为硅胶时,硅胶表面的硅醇基(呈弱酸性)可与极性基团形成氢键而表现其吸附性能,由于不同组分的极性基团与硅醇基形成氢键的能力不同,从而实现分离。极性越强的组分K值(分配系数)大,移动速度慢,Rf值就小;反之,极性较弱的组分K值小,移动速度快,则Rf值就大。若组分固定,则展开剂极性越强,K值越小,即极性越强的展开剂的洗脱能力越强,推进组分向前移动的速度越快。
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(二)分配薄层色谱
分配薄层色谱法是以液体为固定相的薄层色谱法。利用试样中各组分在固定相或流动相中的溶解度差别,即在两相间的分配系数的不同,在薄层板上进行无数次的分配。
基本原理
溶质分子在固定相中溶解度较大,或在流动相中的溶解度小,则K越大。分配系数大的组分在固定相中保留较强,移动速度慢,Rf值小;分配系数小的组分在固定相中保留较弱,移动速度快, Rf值大,从
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